科研产出
基于SNP标记的菜豆品种真实性和纯度鉴定技术
《山东农业科学 》 2019
摘要：为了探索SNP标记技术在菜豆真实性和品种纯度鉴定中的应用,采用2b-RAD技术对200份国内外菜豆品种进行全基因组扫描、分析和评价,从中筛选出3 302个高分辨率、单拷贝和分布比较均匀的SNP标记,可以将除2个近等基因材料以外的198份品种资源区分开。基于组合最优化算法,利用Haploview 4.2软件获得了菜豆资源鉴定最少SNP位点组合一套,包含46个Tag-SNP标记,与3 302个SNP标记区分结果相同。本研究可为菜豆真实性和品种纯度鉴定技术体系的建立和指纹数据库的构建奠定基础。
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山东省部分地区2018年收获玉米的真菌污染状况研究
《食品安全质量检测学报 》 2019
摘要：目的 对山东省部分地区 2018 年产玉米表面污染真菌进行调查.方法 在马铃薯葡萄糖培养基(potato dextrose agar, PDA)上通过稀释涂布的传统分离培养方法获得真菌菌株, 利用传统的形态学与分子生物学技术相结合的方法对真菌种类鉴定.结果 共获得真菌菌株 169 株, 经形态学鉴定隶属于 8 属: 镰刀菌属(Fusarium), 青霉属(Penicillum), 曲霉属(Aspergillus), 交链孢属(Alternaria), 枝顶孢属(Acremonium), 梗霉属(Lichtheimia), 枝孢属(Cladosporium)、篮状菌属(Talaromyces).其中, 镰刀菌(Fusarium)、青霉(Penicillum)、曲霉(Aspergillus)分离获得的数量最多, 镰刀菌种类是引起玉米穗腐病的主要病原菌, 其污染主要来自于田间.随玉米仓储时间延长, 优势真菌改变为青霉属和曲霉属.结论 山东地区玉米真菌污染初期以田间污染为主, 储藏过程中优势菌群受环境影响发生改变; 需要根据真菌污染状况改进提升传统果穗囤藏技术.
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葡萄根癌病病原菌的筛选及鉴定
《农学学报 》 2019
摘要：明确引起济南南部山区葡萄根癌病的病原菌种类,为病害防治提供科学依据。以形态学为基础,结合生理生化及分子生物学方法对‘赤霞珠’葡萄根癌病样品进行分离鉴定。结果表明,从根部肿瘤组织中利用MW选择性培养基分离纯化了12株类似于根癌土壤杆菌的细菌。形态学和16S rDNA检测表明12株菌均为根癌土壤杆菌属。其中生化Ⅰ型5株、生化Ⅱ型4株、生化Ⅲ型3株。采用针刺涂抹法接种胡萝卜圆盘、向日葵、葡萄幼苗,确定了2株强毒性菌株JC02、JC05。2个株菌均为生化Ⅲ型菌株。质粒生物学鉴定表明JC02、JC05菌株含有Ti质粒,为章鱼碱类型。研究表明,为害济南南部山区‘赤霞珠’葡萄根癌病的病原菌为葡萄土壤杆菌(Agrobacterium vitis)。
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奶牛卵巢中一株IBRV的分离鉴定
《山东农业科学 》 2019
摘要：利用MDBK细胞从奶牛卵巢中分离到一株牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)毒株。设计扩增IBRV的通用引物,对卵巢组织中的病毒进行PCR扩增及测序;对卵巢组织感染MDBK细胞,进行IBRV的分离培养;测定IBRV的TCID_(50),同时利用IBRV FA进行鉴定。结果表明,分离到的病毒在MDBK细胞上产生了明显的病变;用特异性引物可扩增出特异性目的条带,目的序列与IBRV基因序列一致;该毒株的病毒滴度为10~(6.75) TCID_(50)/mL。
关键词： 卵巢 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV) 鉴定 细胞病变 TCID_(50)
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消氨菌的分离、鉴定及其急性经口毒性
《山东农业科学 》 2019
摘要：为筛选出安全且能降低畜禽舍内氨气浓度的菌株,本研究从鸡粪、活性淤泥等6个样本中分离单一菌株,检测菌株的除氨效果,并对较优除氨功能的菌株进行鉴定和急性经口毒性试验。结果表明,分离到两株单一菌株,经检测其中一株具有较强除氨能力,初步鉴定该菌株属于金黄杆菌属(Chryseobacterium);经急性经口毒性试验发现,菌液对小鼠半数致死量(LD_(50))大于20 g/kg BW,属实际无毒级;处理14 d后,小鼠血清中谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)、尿素(BUN)、肌酐(Cre)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量与对照组均无显著性差异(P>0.05)。因此,该菌安全无毒副作用,可应用于畜禽养殖业有害气体的消除。
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鸡传染性支气管炎病毒山东分离株S1的测序分析及致病性
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：从山东某地疑似患肾型鸡传染性支气管炎(IB)的病死鸡的肝、肺、肾脏中分离到1株病毒,经过SPF鸡胚传代接种、血凝试验、鸡胚矮化试验、RT-PCR鉴定及测序分析、动物回归试验,确定为鸡传染性支气管炎病毒,并命名为SD/04/18株.结果显示,经3%胰蛋白酶处理后,病毒分离株有血凝性,未经处理病毒分离株不具有血凝性;鸡胚矮化试验发现该毒株明显抑制胚胎发育;进化树比对发现,该毒株与我国主要流行的QX株同源性最高,S1基因序列相似性为96.4%,氨基酸序列相似性为95.3%.分离株用SPF鸡胚连续传3代后接种8日龄SPF雏鸡,复制出了与自然病例相同的临床症状,肺、脾、肾、气管等器官出现典型病理变化.免疫组织化学法检测在气管环纤毛、肾小管上皮细胞间隙等部位可见抗原聚集.对被感染试验鸡的口腔、泄殖腔排毒进行跟踪检测,直到试验结束,被感染鸡仍有很高的病毒检出率.结果表明,最终确定该毒株为肾型鸡传染性支气管炎病毒.
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 分离 鉴定 S1基因 病理变化 免疫组化
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防治蔬菜灰霉病的生防菌SFJ1的鉴定及抑菌活性
《农药 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为创制生物农药,对一株生防菌SFJ1进行了菌种鉴定,同时考察其抑菌活性。[方法]通过生理生化和16S rDNA基因序列分析,对生防菌SFJ1进行鉴定;通过含毒介质法和叶面喷雾法,分别测定生防菌的室内毒力和盆栽防效。[结果]生防菌SFJ1鉴定为贝莱斯芽胞杆菌,对黄瓜灰霉病室内EC_(50)和EC_(90)值分别为0.6594×10~4、36.0036×10~4 cfu/mL;经生防菌发酵原液处理后,黄瓜灰霉病的盆栽4、7 d防治效果分别为86.84%和84.09%。[结论]该生防菌具有开发成生物农药的潜力。
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山东茶园土壤几丁质降解菌的分离、鉴定及产酶特性研究
《山东农业科学 》 2018
摘要：为了筛选到适合山东茶园土壤环境的几丁质降解菌,以提高土壤几丁质的降解速率,本试验以胶状几丁质为唯一碳源,从山东省泰安市茶园土壤中筛选出两株高活性几丁质降解菌,命名为J4、J17。通过生理生化、形态观测和分子鉴定,确定J4属于鞘氨醇杆菌属,J17属于芽孢杆菌属。产酶特性研究表明,最优产酶条件菌株J4为培养温度30℃、pH值7.0、转速200 r/min,J17为培养温度25～30℃、pH值7.0、转速180 r/min;混合菌株J4+J17的产酶能力比J4、J17单一菌株的产酶能力高,分别高出9%和23%。本研究结果可为后续菌剂的制备及工厂化发酵研究奠定基础。
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