科研产出
液相色谱—串联质谱法研究地克珠利在家兔组织中残留及消除规律
《畜牧与饲料科学 》 2011
摘要:[目的]建立一种检测家兔组织中地克珠利含量的液相色谱—串联质谱法(LC-MS/MS),研究地克珠利在家兔组织中的残留及消除规律。[方法]选择48只家兔(雌雄各半),在饲料中加入10g/1000kg地克珠利混饲,连续饲喂30d。分别于休药后的第0、1、2、3、4、5、6天,每个时间点随机处死6只家兔(雌雄各半),取肌肉、肝脏、肾脏组织,DMF/乙腈沉淀法提取并用LC-MS/MS法检测地克珠利残留量。[结果]地克珠利在肾脏中的残留量最高(休药0d为912.6μg/kg),肝脏次之(休药0d为156.1μg/kg),肌肉最低(休药0d为43.1μg/kg),在肾脏中的消除速度最快。[结论]该方法适于检测家兔组织中的地克珠利含量。休药0d即可满足欧盟要求。
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灰黄霉素在家兔组织中的分布及残留消除规律研究
《中国兽药杂志 》 2011
摘要:研究灰黄霉素在家兔组织中的分布及消除规律,为灰黄霉素用于治疗家兔真菌病的安全性评价提供依据。选择42只新西兰白兔,于饲料中添加灰黄霉素(800 g/1000 kg)混饲,连续饲喂14 d,分别于停药后13、、57、、9、142、1 d,各处死6只,取其肝、肾、肌肉、皮肤及脑组织。以盐酸普萘洛尔为内标,二氯甲烷提取后用高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS)进行各种组织中灰黄霉素浓度分析。结果显示,连续用药14 d后,灰黄霉素在家兔组织中的分布情况为:肝组织浓度最高(134.61μg/kg),肾组织次之(54.09μg/kg),脑组织浓度最低(未检出);停药后,随着时间的延长,灰黄霉素在肌肉、肝、肾和皮肤组织中的浓度逐渐下降,且在肝脏中的消除速度最快,停药21d后,灰黄霉素在肾组织中浓度为3.39μg/kg,在肝组织中浓度为12.36μg/kg,其他组织低于定量限或未检出。建议家兔生产中慎用灰黄霉素。
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家兔皮肤真菌通用引物PCR检测和培养鉴定的比较研究
《西南农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:本研究比较了家兔皮肤真菌通用引物PCR检测方法与培养鉴定方法的敏感性,探讨了通用引物PCR检测方法的特异性及其在皮肤真菌诊断中的意义。根据皮肤真菌特异性rDNA序列设计通用引物,对已知分离株及不同微生物进行特异性检测,应用该引物对40份兔患部病料进行PCR检测并克隆测序;同时,采用培养鉴定对40份病料进行表型分析。PCR检测结果显示,家兔四种常见病原性皮肤真菌可扩增出400~500 bp之间的条带,其它微生物和兔体细胞均为阴性,说明该方法具有特异性;33份临床病料检测为阳性,扩增条带均为460 bp,经测序为须癣毛癣菌。培养法的阳性为26份,检测结果与前者一致。与传统的培养鉴定方法相比,本研究建立的通用引物PCR检测方法,操作简便、特异性高,可用于大规模的家兔皮肤真菌病检测和流行病学调查,并具有重要的公共卫生意义。
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HPLC法检测家兔血浆中地克珠利含量
《中国兽药杂志 》 2011
摘要:建立了快速、稳定的家兔血浆中地克珠利提取方法,为进一步研究家兔组织中地克珠利的残留量提供基础。采用HPLC法以妥曲珠利为内标,N,N-2甲基甲酰胺及乙腈联合沉淀法提取家兔血浆中地克珠利,色谱柱为Hypersil ODS(2.5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈∶水∶三乙胺∶冰乙酸=55∶45∶0.2∶0.12(V/V),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为240 nm。在0.156~20.0μg/mL浓度范围内,地克珠利的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系(r2=0.999 2);回收率为98.9%~102.4%;方法精密度RSD最大值为6.8%;最低检测限为0.078μg/mL。DMF及乙腈联合沉淀法适用于家兔血浆中的地克珠利的提取。
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恩诺沙星在家兔组织中的残留消除规律研究
《实验动物与比较医学 》 2011
摘要:目的 探讨恩诺沙星在家兔组织中的残留消除规律.方法 选择44只新西兰兔,肌肉注射恩诺沙星注射液,注射剂量为2.5 mg/kg体重,每天2次,连续注射5 d,试验组分别于停药后的第1、3、5、7、9、11、13天,随机处死6只(雌雄各3只),取肌肉、肝脏、肾脏,进行恩诺沙星和环丙沙星残留量测定.结果 停药24 h后,家兔组织中的恩诺沙星和环丙沙星残留总量已低于欧盟和农业部的最高残留限量(MRL).结论 本研究可以为制定肉兔合理的休药期提供依据.
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山东省某规模化兔场皮肤真菌病的快速诊断
《山东农业大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:为了鉴定某规模化兔场发生皮肤真菌病的病原,并为家兔皮肤真菌病的快速检测提供一种分子生物学方法。根据皮肤真菌特异性rDNA序列设计通用引物(5′-CACCGCCCGTCGCTACTAC-3′和5′-TTTCGCT-GCGTTCTTCAT-3′),对已知分离株及其他微生物等进行特异性检测;应用该引物对所采取的种兔患部病料35份和临床健康种兔的样本5份,进行PCR检测并克隆测序。该引物对四种常见病原性皮肤真菌分离菌株扩增出一条在400bp-500bp之间的条带,其中红色毛癣菌和须癣毛癣菌为460bp,犬小孢子菌500bp,石膏样小孢子菌为400bp,但对其它微生物和兔体细胞均未扩增出类似片段,说明具有特异性;对临床35份病料中的33份均扩增出一条460bp条带,为毛癣菌属,与测序结果一致。健康种兔的样品未扩增出类似片段。本研究利用通用引物对家兔皮肤真菌病进行PCR检测并确定其主要病原,具有快速、简便和特异性强等特点,可用于大规模的家兔皮肤真菌病的诊断,并具有重要的公共卫生意义。
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