花生区组间杂种未成熟籽仁cDNA PCR库的构建与初步筛选

王传堂; 杨新道; 陈殿绪; 王东; 《花生学报 》 2003

摘要：从不亲和野生花生Arachisglabrata Benth与栽培种种间杂种中提取mRNA,反转录成cDNA双链并连接上接头,用接头上的引物进行PCR高保真扩增,成功建立了花生cDNA PCR库。用光敏生物素标记的探针与链亲和素包被的磁珠进行杂交筛库,与探针杂交的片段经洗脱、高保真扩增并加A后与T载体连接,转化受体菌XL1-Blue,获得白色阳性克隆菌落。用PCR快速鉴定的方法进行阳性菌落筛选,得到目的阳性克隆后测序,将可得到cDNA全编码区序列。本研究为改良花生品质与抗性奠定了基础。

关键词： 花生 ω-6油酸去饱和酶(DES)基因 花生白藜芦醇合酶(RS)基因 克隆 cDNAPCR库构建 筛选