科研产出
微量肉汤稀释法药敏试验的误差分析
《中国抗生素杂志 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：药敏试验是抗菌药理学的重要内容,也是临床施药的重要依据。在严格参照CLSI药敏试验标准的情况下,测定的最低抑菌浓度(MIC)结果依然波动。本文分析了微量肉汤稀释法存在的试验误差和差异,包括同一个菌落的重复试验、同一菌株的不同菌落测定值、同一只鸡肠道分离的不同菌株测定值、以及试验操作人员测定值、同一鸡舍不同鸡测定值。结果表明,前3项因素差异不显著,整体试验存在1~2个梯度的误差,主要是由于菌株群体MIC的离散性、倍比设置的抗生素梯度的离散性,以及肉眼观察浊度的主观误差造成。值得注意的是,同一鸡舍不同鸡个体差异可能较大,在条件允许的情况下,尽可能多采集几只鸡样品,以MIC频率分布表征菌群整体的抗药性水平。
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用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株
《中国科学:生命科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板:将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.
关键词： 线性梯度平板 E.coli 恩诺沙星 MIC 抗性菌
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