科研产出
马铃薯卷叶病毒与S病毒重组双CP多克隆抗体的制备
《华北农学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了制备出马铃薯卷叶病毒（PLRV）与S病毒（PVS）重组双CP多克隆抗体并用于PLRV与PVS这2种病毒的间接与DAS-ELISA检测，构建了PLRV与PVS融合双CP基因的原核表达载体pET22b-LRCP/SCP,用超声破碎法代替溶菌酶法裂解重组菌BL21（pET22b-LRCP/SCP）并提取菌体蛋白，用镍离子亲和层析纯化获得了分子质量为51.2 ku的高纯度的重组双CP。用该重组双CP作抗原免疫家兔获得了高效价（1∶128 k）抗血清。纯化的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性标准物特异性结合，与另外4种马铃薯主要病毒（PVX、PVY、PVA与PVM）无交叉反应。间接ELISA反应中，稀释度为1∶3 200的重组双CP多克隆抗体与PLRV或PVS阳性物都呈现阳性反应；在DAS-ELISA反应中，稀释度均为1∶100的重组双CP多克隆抗体及其碱性磷酸酶标记物与PLRV或PVS的阳性标准物也分别呈现阳性反应。结果表明，制备的重组双CP抗体既可用于PLRV与PVS这2种病毒的间接ELISA检测，也可用于DAS-ELISA检测。
关键词： 马铃薯卷叶病毒 S病毒 重组双CP 多克隆抗体 间接ELISA DAS-ELISA
全文链接
请求原文
重组CP多克隆抗体在马铃薯卷叶病毒DAS-ELISA检测中的应用
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：先经过饱和硫酸铵沉淀分离,再用Protein G亲和层析柱纯化,从马铃薯卷叶病毒(PLRV)重组CP作抗原制备的抗血清中获得了高纯度多克隆抗体(IgG),并用戊二醛法一步法进行碱性磷酸酶的标记获得了酶标抗体(IgG-AP)。将纯化的抗体与酶标抗体用于感染PLRV病叶的检测,DAS-ELISA反应呈阳性,结果表明,用重组CP制备的多克隆抗体可成功地用于PLRV的DAS-ELISA检测。本研究为PLRV重组CP多克隆抗体的大量制备及ELISA检测奠定了基础。
关键词： 马铃薯卷叶病毒 重组CP 多克隆抗体 酶标抗体 DAS-ELISA
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
