科研产出
含CpG序列PRRSV ORF5基因真核质粒对猪体免疫作用研究
《中国免疫学杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的:为了增强猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗免疫效力,以pVAX1为真核表达载体,以PRRSV ORF5基因为目的基因,构建了含有CpG和PRRSV ORF5的真核表达质粒CpG-pVAX1-ORF5,并在猪体进行了免疫试验。方法:检测猪PRRSV的特异性抗体滴度、IL-2水平以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平,并做了攻毒保护试验。结果:试验结果表明本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫(显著的淋巴细胞增殖反应水平)。攻毒结果表明CpG-pVAX1-ORF5组能够有效地抵抗经鼻攻毒,可以保护猪轻微病毒血症,比对照组减少80%,也不表现临床症状,对肺的损害能提供部分保护。结论:CpG的加入可使免疫猪的病变减轻或消失。从而表明含有CpG-ODN能作为PRRSVDNA疫苗的有效佐剂。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 CpG DNA免疫
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大肠杆菌免疫刺激DNA的克隆及其对抗体产生的影响
《中国预防兽医学报 》 2002 北大核心 CSCD
摘要：利用聚合酶链式反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)从大肠杆菌基因组中扩增免疫刺激基因 ,并把扩增的基因片段克隆入pGEM_T载体。PstⅠ酶切结果表明重组质粒 (rP)均含有扩增的基因片段 ;rP1与rP2是相同的重组质粒。利用酶联免疫吸附试验检测了重组质粒对小鼠产生抗体的影响 ,结果显示 :重组质粒 1与牛血清白蛋白 (BSA) ,免疫小鼠能产生较高的抗体水平 ,而重组质粒 3则对小鼠产生的BSA抗体水平没有影响。对重组质粒 1的序列分析表明 ,克隆的基因片段中富含CpG序列 ,并含有数个具有强烈免疫刺激作用的RRCGYY(如 :AACGTT)序列。本研究为基因免疫机理的深入研究和基因免疫佐剂的开发奠定了基础
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