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大肠杆菌免疫刺激DNA的克隆及其对抗体产生的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 李爱芹 1 ; 庄文忠 1 ; 任红梅 1 ; 钱凤芹 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院生命科学研究中心

关键词： PCR;CpG;质粒;抗体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2002 年 24 卷 03 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用聚合酶链式反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)从大肠杆菌基因组中扩增免疫刺激基因 ,并把扩增的基因片段克隆入pGEM_T载体。PstⅠ酶切结果表明重组质粒 (rP)均含有扩增的基因片段 ;rP1与rP2是相同的重组质粒。利用酶联免疫吸附试验检测了重组质粒对小鼠产生抗体的影响 ,结果显示 :重组质粒 1与牛血清白蛋白 (BSA) ,免疫小鼠能产生较高的抗体水平 ,而重组质粒 3则对小鼠产生的BSA抗体水平没有影响。对重组质粒 1的序列分析表明 ,克隆的基因片段中富含CpG序列 ,并含有数个具有强烈免疫刺激作用的RRCGYY(如 :AACGTT)序列。本研究为基因免疫机理的深入研究和基因免疫佐剂的开发奠定了基础

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