科研产出
桃PpSnRK1α基因调控植株的生长发育进程
《植物生理学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:为探讨桃Sn RK1蛋白激酶对植株生长发育进程的调控作用,本研究从毛桃[Prunus persica (L.) Batsch]叶片中克隆到Sn RK1蛋白激酶α催化亚基编码基因Pp Sn RK1α,并通过农杆菌介导转化拟南芥(Arabidopsis thaliana),获得超表达PpSnRK1α的拟南芥株系4-1、4-2和4-3。研究发现,在MS培养基中,转基因株系幼苗的平均真叶数比野生型(WT)增多,平均鲜重约是WT的2倍,侧根数显著增加,而主根的长度明显变短,约是WT主根长度的1/2。在营养钵中,超表达PpSnRK1α的拟南芥株系4-2和4-3的花期及衰老进程比WT延迟,与衰老相关的基因SEN1和SEN5的表达量显著降低。上述结果表明,桃PpSnRK1α基因促进拟南芥幼苗的生长,延缓植株的花期及衰老进程。
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桃PpSnRK1β1和PpSnRK1β2在番茄中超表达对光合碳代谢的影响
《园艺学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要:从毛桃[Prunus persica(Linn.)Batsch.]叶片中克隆了PpSnRK1蛋白激酶β亚基编码基因PpSnRK1β1和PpSnRK1β2,其c DNA全长分别为720 bp和867 bp。q RT-PCR组织表达分析表明,PpSnRK1β1在‘鲁星’桃叶片中的表达量最高,PpSnRK1β2在其果实中表达量最高,两者在其花中的表达量均较低。通过农杆菌介导转化番茄,获得超表达PpSnRK1β1的番茄株系T21、T23和超表达PpSnRK1β2的株系T91、T92。研究发现,与野生型(WT)相比,超表达株系T23和T91叶片的Sn RK1蛋白激酶活性分别增加9.84%和53.32%。T91叶片净光合速率比WT提高17.02%;叶片可溶性糖含量比WT增加34.00%。T91和T92叶片淀粉含量分别约是WT的2倍。T23、T91和T92果实维生素C含量分别比WT下降19.21%、38.49%和39.76%。因此说明PpSnRK1β1和PpSnRK1β2参与了光合作用过程,调控碳代谢及次生代谢过程。
关键词: 桃 PpSnRK1β1 PpSnRK1β2 超表达 番茄 光合作用 碳代谢
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超表达Cdc20基因不影响牛卵母细胞第一极体排出
《中国生物化学与分子生物学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:CDC20(cell division cycle 20)是后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)的共激活剂之一,也是纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的靶点,在细胞周期调控中扮演重要角色.为探讨Cdc20在第一极体排出(first polar body extrusion,PBE I)中的作用,Cdc20基因被成功克隆并构建了真核表达载体pCdc20-Venus,随后用T7 Mmessage Mmachine Kit(Ambion)以线性化pCdc20-Venus为模板体外转录(in vitro transcription)获得带帽的Cdc20-Venus mRNA,将Ccdc20-Venus mRNA显微注射到体外培养的牛卵母细胞胞质中进行超量表达.结果表明,真核表达载体pCdc20-Venus转染HeLa细胞后能够正常表达,绿色荧光在细胞核周围呈弥散状分布;将Cdc20-Venus mRNA注射到牛卵母细胞胞质后,胞质内有绿色荧光出现.Cdc20-Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(48.9%)与Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(50.9%)和未注射组卵母细胞的PBE I率相比均没有显著差异(P>0.05).通过Cdc20在牛卵母细胞内的超量表达,结果显示,超量表达Cdc20基因对牛卵母细胞PBE I没有显著影响(P>0.05).
关键词: 牛 Cdc20 卵母细胞 超表达 减数分裂 第一极体排出率
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