文献类型： 中文期刊
作者： 杨文琳 1 ; 安鹏 2 ; 李伟 2 ; 赵贵民 2 ; 史芸安 2 ; 雷安民 2 ;
作者机构： 1.西北农林科技大学动物医学院
2.西北农林科技大学动物医学院;陕西省干细胞工程技术研究中心;山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词： 牛;Cdc20;卵母细胞;超表达;减数分裂;第一极体排出率
期刊名称： 中国生物化学与分子生物学报
ISSN： 1007-7626
年卷期： 2012 年 28 卷 06 期
页码： 546-554
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： CDC20(cell division cycle 20)是后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)的共激活剂之一,也是纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的靶点,在细胞周期调控中扮演重要角色.为探讨Cdc20在第一极体排出(first polar body extrusion,PBE I)中的作用,Cdc20基因被成功克隆并构建了真核表达载体pCdc20-Venus,随后用T7 Mmessage Mmachine Kit(Ambion)以线性化pCdc20-Venus为模板体外转录(in vitro transcription)获得带帽的Cdc20-Venus mRNA,将Ccdc20-Venus mRNA显微注射到体外培养的牛卵母细胞胞质中进行超量表达.结果表明,真核表达载体pCdc20-Venus转染HeLa细胞后能够正常表达,绿色荧光在细胞核周围呈弥散状分布;将Cdc20-Venus mRNA注射到牛卵母细胞胞质后,胞质内有绿色荧光出现.Cdc20-Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(48.9%)与Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(50.9%)和未注射组卵母细胞的PBE I率相比均没有显著差异(P>0.05).通过Cdc20在牛卵母细胞内的超量表达,结果显示,超量表达Cdc20基因对牛卵母细胞PBE I没有显著影响(P>0.05).
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