科研产出
融合蛋白C3d提高新城疫灭活苗的免疫原性
《西南农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研究、利用鸡补体C3d奠定了基础。
关键词： C3d RT-PCR 亲和层析 MTT 血凝抑制试验
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H_5亚型禽流感单克隆抗体的研制及应用
《家禽科学 》 2005
摘要：以禽流感H5亚型病毒分别免疫BABL/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)和间接ELISA检测细胞上清液,结果获得了3株抗禽流感H5亚型病毒特异性单克隆抗体,分别命名为1B6,1D4,7D1;其中1D4株为抗禽流感H5亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株,1B6株和7D1株为针对禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体细胞株。经3次亚克隆后,100%杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感病毒抗体的能力。这些单克隆抗体小鼠腹水ELISA效价为105,HI效价为211￣12。研究结果表明,所有这些单克隆抗体仅与相应的禽流感病毒株发生特异性反应,而不与鸡新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、鹅副粘病毒等反应。所有这些单抗在禽流感诊断中将发挥重要作用。
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