科研产出
花生条纹病毒病和黄瓜花叶病毒病种子带毒和田间发病情况研究
《花生学报 》 2015
摘要:花生条纹病毒(Peanut stripe virus,PStV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是影响山东花生生产的两种重要病毒。本研究选取小花生品种花育20号和大花生品种花育36号/花育22号,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对山东省5个地区的样品进行两种主要病毒的检测。结果表明:花生两种主要病毒病在山东省5个地区都可以检测到,各地区种子带毒率和发病率存在明显差异,小花生种子的带毒率普遍高于大花生,田间发病率也普遍高于大花生,两种病毒存在复合侵染的情况。
双重RT-PCR方法检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒
《花生学报 》 2012
摘要:为了建立花生条纹病毒(PStV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的双重RT-PCR检测方法,根据Gen-Bank中登陆的PStV和CMV的核苷酸保守序列分别设计特异性引物,以感病叶片总RNA反转录物为模板,建立了双重RT-PCR反应体系,并对双重RT-PCR的特异性和灵敏性进行了验证。结果表明:此方法能够特异地从感染PStV和CMV的样品中扩增出PStV(300bp)和CMV(1054bp)2个条带,与实验设计相符;扩增产物测序结果表明,PStV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为93%~99%,CMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为90%~99%,证明了检测结果的准确性;该方法特异性良好,灵敏性与单一扩增相同,能够特异、灵敏、准确地检测花生CMV和PStV。
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山东省花生病毒的RT-PCR检测
《山东农业科学 》 2011
摘要:应用RT-PCR方法检测了2008~2009年在山东各地采集的153个花生病叶样品,检测到花生条纹病毒(Peanut stripe virus,PStV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和花生斑驳病毒(Peanutmottle virus,PeMoV)。PStV的检出率最高,为48.4%,在山东各花生产区均有发生;CMV的检出率为19.0%,在泰安、青岛、潍坊、聊城和临沂等地有发生;CMV与PStV的复合侵染率为9.2%。PeMoV目前仅在青岛地区发现。
关键词: 花生 花生条纹病毒 黄瓜花叶病毒 花生斑驳病毒 复合侵染
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花生条纹病毒外壳蛋白基因cDNA的合成、克隆及全序列测定
《农业生物技术学报 》 1999 CSCD
摘要:自田间采集的花生病叶中提取花生条纹病毒( PStV) 总RNA,人工合成引物P1 、P2 ,通过RTPCR 扩增合成PStVcp 的cDNA,并将其克隆到pGEMT 载体上。经限制酶谱分析后进行全序列测定,结果表明:该基因由1 084 个核苷酸组成,包含了PStVcp cDNA 完整的861 bp 编码序列( 编码287 个氨基酸)以及3'端223 bp 非编码序列,与文献报道的4 个PStVcp 基因相比同源性均在96 % 以上,且其编码的氨基酸同源性均在975 % 以上,说明PStVcp 基因具有较高的保守性。
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花生条纹病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达
《花生科技 》 1999 北大核心
摘要:用内切酶Bam HI和EcoRI将pGEM- StV 含有的约11Kb 大小的PStV- cp 基因切下定向插入到表达质粒pBV220 的启动子PR、PL的下游,构建了该基因的原核表达载体pBV- StV。SDS- PAGE凝胶电泳结果表明:PStV- cp 基因在大肠杆菌DH5α中经温度(40℃)诱导后,可特异地表达33kD蛋白。
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