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双重RT-PCR方法检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 谢宏峰 1 ; 吴菊香 1 ; 迟玉成 1 ; 许曼琳 1 ; 陈蕾 1 ; 许婷婷 1 ;

作者机构： 1.山东省花生研究所

关键词： 花生条纹病毒;黄瓜花叶病毒;双重RT-PCR

期刊名称： 花生学报

ISSN： 1002-4093

年卷期： 2012 年 41 卷 01 期

页码： 16-20

摘要： 为了建立花生条纹病毒(PStV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的双重RT-PCR检测方法,根据Gen-Bank中登陆的PStV和CMV的核苷酸保守序列分别设计特异性引物,以感病叶片总RNA反转录物为模板,建立了双重RT-PCR反应体系,并对双重RT-PCR的特异性和灵敏性进行了验证。结果表明:此方法能够特异地从感染PStV和CMV的样品中扩增出PStV(300bp)和CMV(1054bp)2个条带,与实验设计相符;扩增产物测序结果表明,PStV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为93%～99%,CMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为90%～99%,证明了检测结果的准确性;该方法特异性良好,灵敏性与单一扩增相同,能够特异、灵敏、准确地检测花生CMV和PStV。

  • 相关文献

[1]花生条纹病毒病和黄瓜花叶病毒病种子带毒和田间发病情况研究. 许曼琳,张竹青,吴菊香,张天培,迟玉成,谢宏峰,王磊. 2015

[2]山东省花生病毒的RT-PCR检测. 侯珊珊,刘媛媛,迟玉成,韩金惈,禹山林,李向东. 2011

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[5]兔轮状病毒、兔肠冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 赵巧雅,宋丹丹,刘丽萍,郭效珍,刘存霞,盛媛,史玉颖,黄兵. 2021

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[7]花生条纹病毒外壳蛋白基因cDNA的合成、克隆及全序列测定. 毕玉平,李广存,王秀丽,李杰文,单雷,郭宝太,路艳辉,徐平丽. 1999

[8]花生条纹病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达. 李广存,毕玉平,王秀丽,单雷,徐平丽,柳展基,路艳辉. 1999

[9]花生条纹病毒外壳蛋白基因植物表达载体构建及遗传转化研究初报. 徐平丽,张传坤,赵晋平,李广存,李新国,单雷. 2006

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