科研产出
洋葱orf393基因线粒体定位表达载体构建及功能初探
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：通过转基因拟南芥表型分析对洋葱线粒体差异表达基因orf393的功能进行了初步研究.通过In-Fusion Cloning的方法,将基因orf393与编码线粒体定位的靶向肽序列Rf1b5'融合,构建了orf393基因的线粒体定位表达载体pROK2-Rf1b5'-orf393,通过花序浸染法成功转化至野生型拟南芥,获得了雄性育性降低的拟南芥转基因植株,转基因植株的雄蕊花丝变短,柱头表面光滑几乎没有花粉附着,花药颜色暗淡无法正常开裂,种荚短小皱缩、结实率低.亚历山大染色实验结果显示,转基因植株的花药中花粉量少,仅含有极少量的活性花粉.初步证明线粒体基因orf393与细胞质雄性不育有一定关系,为明确orf393参与洋葱细胞质雄性不育的分子机制提供了参考.
关键词： 洋葱(Allium cepa L.) orf393 细胞质雄性不育 遗传转化
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洋葱雄性不育分子标记在单倍体鉴定中的应用
《生物技术通报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为有效鉴定和利用洋葱单倍体,以3个洋葱杂交种的未受精花蕾为外植体,通过离体雌核发育途径诱导产生再生植株.利用流式细胞仪对再生植株的倍性进行鉴定,利用DNF-566、RNS-357和AcSKP1标记对再生植株进行纯合性检测.结果表明,源于"阿盾"和"地球"的再生植株在Ms位点的基因型均为纯合的.源于"大宝"的16株再生植株中,有13株在Ms位点的基因型是纯合的,3株是杂合的.说明纯合植株是由大孢子母细胞发育而来,杂合植株可能是由子房壁或其他体细胞发育而来的二倍体.共获得7株二倍体,其中4株为双单倍体.获得的双单倍体,可进一步作为杂交种选育的亲本材料.洋葱Ms位点的分子标记可以作为一种有效的分子标记手段用于洋葱单倍体再生植株与供体杂交种亲本的同源性分析,与流式细胞仪结合起来可以快速准确鉴定双单倍体.
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洋葱S型细胞质雄性不育相关基因的挖掘及分子标记开发
《园艺学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以洋葱(Allium cepa L.)S型细胞质雄性不育系和保持系材料为试材,对洋葱线粒体全基因组中的58个开放阅读框(ORF)进行差异表达分析,发现了一个表达差异片段orf393。采用实时荧光定量PCR技术,利用洋葱S型细胞质雄性不育系和保持系的根,叶片,花茎以及花粉母细胞、四分体、单核花粉粒、成熟花粉粒等4个发育时期的花蕾对orf393进行时空表达分析。结果表明:orf393在洋葱S型细胞质雄性不育系的根、叶片、花茎和4个发育时期的花蕾中均有表达,尤其是在四分体时期花蕾中表达量最高,之后恢复到营养生长时期的表达水平,但在保持系中未见其表达,这表明orf393是组成型表达,可能与洋葱的花粉发育存在某种关联。利用orf393在S型细胞质雄性不育系和保持系之间的序列差异,开发了一个稳定可靠的鉴别洋葱细胞质类型的SCAR分子标记GXX393。
关键词： 洋葱 细胞质雄性不育 orf393 基因表达 分子标记
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大白菜细胞质雄性不育研究进展
《山东农业科学 》 2018
摘要：细胞质雄性不育在大白菜杂种优势利用中具有非常重要的应用价值。大白菜细胞质雄性不育主要分为大白菜波里马细胞质雄性不育(Pol CMS)和萝卜细胞质雄性不育(Ogu CMS)两种类型。Pol CMS已在生产实践中得到应用,而Ogu CMS在生产应用方面还存在一些问题,需要进一步完善。对大白菜细胞质雄性不育形成机理的研究结果表明,细胞质雄性不育系的花药组织在发育过程中脱落酸和细胞分裂素的含量均高于其相应的保持系,而游离氨基酸(特别是脯氨酸的含量)、蛋白质、可溶性糖等营养物质均低于其保持系。大量的证据表明,线粒体基因组的重组或重排是造成细胞质雄性不育的关键因素,但是目前尚无直接证据表明叶绿体与细胞质雄性不育相关。本研究从以上几个方面综述了近年来大白菜细胞质雄性不育的研究进展,并对其发展前景进行了预测与展望。
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记的开发
《山东农业科学 》 2015
摘要：根据细香葱orf A501开发的特异引物,以洋葱细胞质雄性不育系为试材进行PCR扩增,对获得的片段进行回收测序,根据测序结果设计引物进行染色体步移,获得部分侧翼序列,开发了鉴定洋葱细胞质基因型的SCAR标记,命名为OC2175。该标记在洋葱不育系中扩增出一条2 175 bp的特异条带和1 053 bp的条带,而保持系中仅扩增出1 053 bp的条带。对17组不同遗传背景的不育系及其相应的保持系进行验证,该SCAR标记的鉴定结果与田间表型判断结果完全吻合。
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洋葱细胞质雄性不育基因分子标记研究进展
《中国蔬菜 》 2015 北大核心
摘要：洋葱是典型的异花授粉蔬菜作物,利用雄性不育系是进行洋葱杂交种选育的重要手段。传统的测交方法鉴定洋葱雄性不育基因型需要4~8a时间,通过开发洋葱细胞质雄性不育基因分子标记可以大大提高保持系选择效率,有助于揭示雄性不育作用机理。本文介绍了洋葱细胞质雄性不育的几种类型,对控制洋葱育性的细胞质与细胞核基因分子标记的研究进展进行了综述,讨论了分子标记技术的现状及存在的问题,并对应用前景进行了展望。
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小麦V-CMS和杂种F_1代线粒体蛋白质组表达差异
《分子植物育种 》 2011 CSCD
摘要：本研究以V型小麦恢复基因的近等基因系为基础材料,运用蛋白质组学技术对V-CMS及杂种F1黄化苗和幼穗时期线粒体蛋白质表达图谱进行了比较,分析了差异蛋白质点与CMS的关系。主要结果如下:(1)比较了黄化苗和幼穗线粒体蛋白质的表达图谱,鉴定了10个差异表达的蛋白质点,包括与能量代谢有关的F0-F1ATP酶复合物的亚基和一些功能未知的蛋白质;(2)比较了V-CMS及杂种F1线粒体蛋白质表达图谱,鉴定了12个差异表达的蛋白质点,能量代谢相关的F0-F1ATP酶复合物的ATP酶β亚基和NADH脱氢酶亚基J和其他一些未知蛋白。结果表明,线粒体蛋白质的表达具有组织性和时空性;线粒体能够反向调控核基因编码的蛋白质在线粒体内的堆积,V-CMS中不育基因的表达能够调控线粒体内能量代谢相关蛋白质的表达水平,小麦V-CMS败育的发生可能是一种过早的PCD过程。
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细胞质雄性不育系统中的核质互作研究进展
《山东农业科学 》 2008
摘要：细胞质雄性不育和育性恢复是一种普遍的生物学现象,它为研究植物的核质互作效应提供了理想的材料。本文对鉴定与细胞质雄性不育相关基因的方法以及目前细胞质雄性不育系统中的核质互作研究现状进行了综述。
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大豆细胞质COXⅡ基因的分离及序列分析
《大豆科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目前关于细胞质雄性不育的机理研究主要集中在植物线粒体上,通过参考大豆线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ(COXⅡ)基因序列,合成保守基因引物,从供试材料中克隆到了COXⅡ基因,对基因序列分析表明:该基因编码了一个有280个氨基酸组成的蛋白,推测其可能与大豆细胞质不育有关。
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