科研产出
氧化应激通过Fas/FasL信号通路调控奶牛子宫内膜细胞凋亡
《畜牧兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：胚胎早期死亡及流产严重影响母牛的繁殖性能，造成极大的经济损失。本研究利用不同浓度双氧水（H2O2）处理子宫内膜细胞6 h,通过流式细胞仪、酶标仪分别进行细胞内活性氧（ROS）水平、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性以及还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG）比值检测，建立子宫内膜细胞氧化应激模型。在此基础上，利用流式细胞仪检测细胞凋亡和生长周期，利用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Fas/FasL信号通路关键基因的mRNA和蛋白表达水平，并利用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）抑制子宫内膜细胞中Fas基因表达，进一步验证Fas/FasL凋亡通路是否参与氧化应激诱导的子宫内膜细胞凋亡。所有试验都重复3次以上。结果发现，利用200μmol·L-1 H2O2处理子宫内膜细胞6 h,细胞内ROS阳性水平急剧增加（P<0.05）,SOD和CAT活性以及GSH与GSSG比值都显著降低（P<0.05）,说明H2O2处理对子宫内膜细胞造成氧化应激损伤。在此处理条件下，生长周期中S期比例显著降低（P<0.05）,凋亡比例显著提高（P<0.05）;Fas/FasL凋亡通路中关键基因Fas、Caspase 8和Caspase 3的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）;培养液中FasL浓度以及Fas、Caspase 8和Caspase 3蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。进一步研究发现，抑制Fas基因表达在一定程度上降低了氧化应激诱导的细胞凋亡比例以及Fas/FasL凋亡通路中关键基因的表达水平。总之，本研究结果表明，氧化应激通过激活Fas/FasL信号通路促进奶牛子宫内膜细胞凋亡，这为解释氧化应激对子宫内膜细胞的不利影响提供了新的见解。
关键词： 氧化应激 Fas/FasL信号通路 细胞凋亡 子宫内膜细胞
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新型化合物F-2对人肺癌NCI-H520细胞增殖、迁移及凋亡的影响
《中国现代应用药学 》 2020 CSCD
摘要：目的探讨新型化合物F-2对人非小细胞肺癌NCI-H520细胞增殖、迁移及凋亡的影响.方法 CCK-8试验检测肺癌细胞增殖情况;采用划痕试验检测化合物对NCI-H520细胞迁移的情况;倒置显微镜观察化合物刺激对细胞形态的影响;流式细胞术检测化合物对细胞凋亡的影响;Western blotting检测化合物对细胞迁移及凋亡相关蛋白表达的影响.结果化合物对NCI-H520细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度和时间呈依赖性关系.划痕试验结果表明化合物能够明显抑制肿瘤细胞迁移,并且Westernblotting试验结果表明化合物处理NCI-H520细胞后可上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin蛋白的表达.Annexin-V/PI双染法结果显示,化合物可诱导NCI-H520细胞发生凋亡,且随着药物浓度增加凋亡率上升,并且增加了BAX/Bcl-2蛋白表达比率.结论化合物能够明显抑制肺癌细胞的增殖、迁移及诱导细胞凋亡,可能是通过阻断肿瘤细胞上皮间充质转化过程,调节细胞凋亡过程中相关基因表达从而发挥抗肿瘤作用.
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菌蜕搭载的埃博霉素促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡
《生物技术 》 2018 北大核心
摘要：[目的]初步探讨菌蜕搭载的埃博霉素抑制HeLa细胞增殖的机制。[方法]用半抑制浓度的游离或菌蜕搭载的埃博霉素B分别处理HeLa细胞4~48 h,应用凋亡检测试剂盒分析细胞凋亡情况,应用Caspase-3分析试剂盒检测Caspase-3的活性,并用透射电镜观察细胞的形态变化。[结果]菌蜕搭载的埃博霉素B能更快地诱导HeLa细胞发生时间依赖的凋亡和坏死,处理24 h时早期凋亡细胞及晚期凋亡和坏死细胞的比例分别达32.72%和18.36%,处理48 h时比例分别达23.14%和51.52%。该药物还能诱导更强的Caspase-3激活,处理24 h时其活性约为游离埃博霉素B的1.5倍。Caspase-3活性的升高程度与细胞的早期凋亡程度相平行。该药物处理的HeLa细胞显示典型的凋亡特征。[结论]菌蜕搭载的埃博霉素B能更有效地促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡。
关键词： 埃博霉素B 菌蜕 HeLa细胞 细胞凋亡 Caspase-3
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猪牙皂皂苷对HepG_2细胞的抗肿瘤作用研究
《中药材 》 2017 北大核心
摘要：目的:以HepG_2人肝癌细胞为模型,研究猪牙皂皂苷的抗肿瘤作用,为进一步的机理研究提供新的依据。方法:猪牙皂皂苷由传统化学方法从猪牙皂中分离提取;CCK-8法检测猪牙皂皂苷对HepG_2细胞增殖的影响;DAPI染色观察细胞凋亡形态;Annexin V/FITC双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。结果:猪牙皂皂苷呈浓度和时间依赖抑制HepG_2细胞增殖,诱导HepG_2细胞凋亡,并能将HepG_2细胞的细胞周期阻滞在G_2/M期。结论:猪牙皂皂苷具有显著的抗肿瘤作用。
关键词： 猪牙皂皂苷 HepG_2人肝癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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益气养阴方及其拆方对急性髓系白血病细胞细胞凋亡及Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF表达的影响
《中国实验方剂学杂志 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对人急性髓系白血病细胞凋亡及细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C),凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1),第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-blinding protein with low PI,Smac/Diablo),凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factors,AIF)表达的影响,探讨益气养阴方治疗白血病的可能作用机制。方法:采用NOD/SCID小鼠,以KG-1a细胞株建立人急性髓系白血病模型,随机分为全方组、祛邪组、扶正组和空白组,取NOD/SCID小鼠脾细胞制成细胞悬液,应用流式细胞术检测NOD/SCID小鼠细胞凋亡率;采用免疫组化法检测NOD/SCID小鼠骨髓中线粒体相关凋亡因子CytC,Apaf-1,Smac/Diablo和AIF的表达。结果:用药后,用药组小鼠生存时间较空白组显著延长(P<0.01),全方组小鼠生存时间较扶正组与祛邪组显著延长(P<0.01),祛邪组小鼠生存时间较扶正组显著延长(P<0.01)。用药组细胞凋亡率较空白组明显升高(P<0.01),全方组较扶正组与祛邪组显著升高(P<0.01),祛邪组较扶正组显著升高(P<0.01)。用药组小鼠骨髓中Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达较空白组显著升高(P<0.05),其中Cyt-C与Apaf-1表达显著升高(P<0.01);全方组均高于扶正组与祛邪组(P<0.01);祛邪组较扶正组均升高(P<0.05),Cyt-C,Apaf-1和Smac/Diablo表达显著升高(P<0.01)。其中对于各指标的影响全方组均优于扶正组与祛邪组,祛邪组均优于扶正组。结论:益气养阴方能够提高NOD/SCID小鼠的细胞凋亡率,上调线粒体相关凋亡因子Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达,并诱导其凋亡,抑制白血病细胞增殖,其机制可能与线粒体凋亡通路有关。
关键词： 急性髓系白血病 益气养阴方 KG-1a细胞 线粒体途径 细胞凋亡
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樟芝发酵液和液体发酵菌丝体提取物对SPCA-1细胞的体外抑制作用
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵液和经95%乙醇浸提后的菌丝体醇提物分别用石油醚和氯仿进行分级提取,得到石油醚和氯仿提取物。对不同提取物进行体外抑制SPCA-1肺癌细胞增殖实验,发现各提取物均可抑制SPCA-1细胞的增殖,其中发酵液石油醚提取物抑制作用最好,IC50为62.5μg/mL,发酵液和菌丝体氯仿提取物的抑制作用较好,IC50分别为120.9和109.5μg/mL,菌丝体石油醚提取物的抑制作用较差,在25~150μg/mL作用浓度下,抑制率低于20%。各提取物对SPCA-1细胞凋亡和生长周期作用的测定结果表明,各提取物在肺癌细胞SPCA-1中通过诱导细胞凋亡及S期周期阻滞来表现其抑制作用。
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定痫方对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元凋亡的影响
《山东中医杂志 》 2011
摘要：目的:观察戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡以及定痫方(AAP)的脑保护作用。方法:144只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(CK组)、模型组(PTZ组)、定痫方大剂量组(AAPl组)、定痫方中剂量组(AAPm组)、定痫方小剂量组(AAPs组)和丙戊酸钠组(VPA组);每组24只。CK组和PTZ组分别给予生理盐水(4 ml/kg体质量.d)灌胃;定痛方各组分别给予定痫方大、中、小剂量(10.26 g/kg体质量、5.13 g/kg体质量、2.56 g/kg体质量)灌胃,VPA组给予丙戊酸钠(20 mg/kg.d)灌胃,每日1次;连续7 d。造模第1天,除CK组外,其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(PTZ)75 mg/kg体质量,观察记录大鼠行为学变化;于致痫后12 h、2 d、5 d、7 d相应时间点取材,制备脑标本,TUNEL检测海马神经元凋亡。结果:致痫后,除CK组外,其余各组海马区凋亡细胞增加;7 d,与PTZ组相比,AAPl组凋亡神经元阳性表达减少(P<0.05)。结论:凋亡参与致痫大鼠海马神经元死亡过程;定痫方能减少神经元凋亡,有神经保护作用。
关键词： 癫痫 模型 中药复方 凋亡 海马区 神经元 细胞凋亡
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小RNA病毒与细胞凋亡
《家畜生态学报 》 2010
摘要：在小RNA病毒科中,口蹄疫病毒等不同病毒的不同基因可诱导宿主细胞发生凋亡,其作用机制也不完全相同。论文对小RNA病毒诱导细胞凋亡的机制进行了综述,并对相关研究进行了展望。
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