科研产出
一株牛副流感病毒3型的分离鉴定及基因组序列分析
《中国病原生物学杂志 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:目的检测和分离引起山东省某规模化牛场成年牛死亡的病原体并进行系统进化树分析.方法取牛肺组织样品进行RT-PCR检测;检测阳性的样品接种MDBK细胞,经盲传3代后出现明显细胞病变再取细胞上清液经特异性引物进行RT-PCR鉴定,并进行全基因组测序.结果成功分离到1株牛副流感病毒3型,命名为SD001.序列分析表明,SD001毒株与宁夏分离株NX49(KT071671.1)同源性较高为99.7%,均属C型BPIV3.结论本研究获得的分离株为牛副流感病毒3型,与宁夏分离株NX49同源性高.为进一步开展BPIV3研究奠定了基础.
关键词: 牛副流感病毒3型 分离鉴定 细胞病变 测序 同源性
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中国荷斯坦牛白细胞黏附缺陷症PCR-RFLP检测方法的研究
《生物技术通报 》 2007 CSCD
摘要:本试验根据已知牛染色体上CD18编码基因序列设计引物,提取牛血液和精液DNA,可扩增出338bp的DNA片段,将PCR产物克隆到pMD18-T载体中,对阳性重组质粒进行测序,确定为牛的CD18基因。由于CD18基因的383位碱基由A变为G,而引起牛白细胞黏附缺陷症(BLAD),通过对济南市11个奶牛场356头奶牛及53头荷斯坦种公牛进行了BLAD的PCR-RFLP检测,共检出3头杂合母牛(携带者),占检测母牛群的0.84%,在荷斯坦公牛中只检测到一种基因型,没有发现隐性突变基因的携带者。
光叶花生两个重要基因片段和克隆和序列测定
《花生学报 》 2003
摘要:从不亲和野生花生Arachis glabrata Benth中提取DNA,在多重序列比对的基础上设计PCR引物,成功扩增出约350、750bp的两个片段,与DES和RS基因片段预期分子量相符.PCR产物与T栽体连接,转化受体菌XL1-Blue,获得了白色菌落,挑取白色菌落在液体培养基中过夜培养,经TTE溶液和热处理后进行PCR扩增,获得了载有目的基因片段的阳性重组子,测序和序列比对分子的结果说明,DES和RS基因片段克隆成功.这是首次从不亲和野生花生A.glabrata Benth中克隆出的基因片段,该片段可用作探针克隆相关基因全编码区.
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光叶花生两个重要基因片段的克隆和序列测定(英文)
《花生学报 》 2003
摘要:从不亲和野生花生ArachisglabrataBenth中提取DNA,在多重序列比对的基础上设计PCR引物,成功扩增出约350、750bp的两个片段,与DES和RS基因片段预期分子量相符。PCR产物与T载体连接,转化受体菌XL1 Blue,获得了白色菌落。挑取白色菌落在液体培养基中过夜培养,经TTE溶液和热处理后进行PCR扩增,获得了载有目的基因片段的阳性重组子。测序和序列比对分析的结果说明,DES和RS基因片段克隆成功。这是首次从不亲和野生花生A.glabrataBenth中克隆出的基因片段。该片段可用作探针克隆相关基因全编码区。
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