科研产出
肉用杂交犊牛小肠上皮细胞的分离培养和鉴定
《动物营养学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在建立肉用杂交犊牛小肠上皮细胞分离培养和鉴定的方法,为研究犊牛小肠上皮细胞营养吸收、免疫调控及肠道屏障功能提供原代细胞培养模型.选用新生未吮乳的肉用杂交犊牛的空肠组织,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法对小肠上皮细胞进行分离,应用相差消化法和相差贴壁法对犊牛小肠上皮细胞进行纯化.通过细胞形态学观察、生长曲线、免疫荧光及染色体核型分析等方法来鉴定细胞.结果表明:1)应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法得到的犊牛小肠上皮细胞生长状况良好,经纯化后得到90%以上纯度的犊牛小肠上皮细胞,并稳定传代至10代以上; 2)犊牛小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律; 3)免疫荧光鉴定犊牛小肠上皮细胞特异性表达角蛋白13和绒毛蛋白; 4)透射电镜观察发现犊牛小肠上皮细胞边缘有微绒毛结构,细胞与细胞之间的紧密连接结构清晰可见; 5)染色体核型分析显示细胞内含有60条染色体,形态正常,呈二倍体核型.综上所述,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化及相差贴壁纯化成功得到犊牛小肠上皮细胞,为研究犊牛小肠上皮细胞营养物质吸收、免疫调控和肠道屏障功能提供了细胞素材.
关键词： 犊牛 小肠上皮细胞 联合消化法 细胞鉴定 核型分析
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不同基因组类型的香蕉核型分析
《果树学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】基于不同基因组类型间的进化程度存在不同程度的差异,在染色体水平上揭示香蕉种质遗传特性。【方法】以9份不同基因组类型香蕉(Musa spp.)种质为材料,采用改良的去壁低渗法对其核型进行分析。【结果】‘霸王岭野生蕉’核型公式为2n=2x=22=4L+8M2+6M1+4S,属"2 A"核型;‘百花岭野生蕉’核型公式为2n=2x=22=4L+8M2+6M1+4S,属"2 B"核型;‘巴西蕉’核型公式为2n=3x=33=3L+15M2+12M1+3S,属"3A"核型;‘Pisang Ceyla’核型公式为2n=3x=33=12L+6M2+6M1+9S,属"2B"核型;‘东莞中把大蕉’核型公式为2n=3x=33=3L+12M2+12M1+6S,属"2B"核型;‘FHIA-17’核型公式为2n=4x=44=4L+20M2+12M1+8S,属"2 B"核型;‘CRBP-39’核型公式为2n=4x=44=4L+16M2+20M1+4S,属"1B"核型;‘FHIA-03’核型公式为2n=4x=44=4L+20M2+16M1+4S,属"2B"核型;‘TMBx5295-1’核型公式为2n=4x=44=4L+20M2+12M1+8S,属"2B"核型。【结论】基于核型分析结果,绘制了9份不同基因组类型香蕉种质的核型模式图。
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