科研产出
HSP在热应激条件下调控鸡心肌细胞损伤的功能分析
《动物医学进展 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：心肌对热敏感,心脏成为热应激损伤的重要器官之一,严重时会引发猝死。热休克蛋白（HPS）是机体在遭受热应激刺激时激活的重要内源性保护机制。为了观察热应激条件下对蛋鸡心肌组织的病理性损伤,以及心肌细胞启动热休克蛋白的变化规律,选用40只300日龄海兰褐蛋鸡构建热应激试验动物模型,通过对血清中肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）和谷草转氨酶（AST）水平的检测以及病理学检测以确定热应激损伤;通过对心肌组织的Hsps的转录水平检测以确定对Hsps的激活;通过系统网络分析,筛选出调控家禽热应激细胞凋亡的相关靶标,并进行相互作用网络和蛋白共表达分析。研究表明,38℃热应激会引起蛋鸡心肌细胞颗粒变性、空泡变性和坏死,导致心肌损伤相关酶谱CK、CK-MB、LDH和AST的上调,还可以激活Cryab、Hsp60、Hsp70和Hsp90转录水平的升高。系统网络分析发现热休克蛋白家族成员CRYAA、HSP90AB1、HSP90B1、HSPA5、HSPD1、DNAJA1和DNAJC3均参与热应激条件下调控家禽细胞凋亡的进程,Hsp90AB1和Hsp90B1可以调控CDK1,Hsp90AB1和HspD1可以与CDK1共表达,Hsp90B1、DNAJC3和IGF1可以调控IL6,影响细胞周期,从而影响细胞凋亡。
关键词： 热应激 心肌细胞 热休克蛋白 病理损伤 系统网络分析
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血清浓度对心肌细胞自噬的影响
《滨州医学院学报 》 2015
摘要：目的观察不同血清浓度对心肌细胞自噬的影响。方法以大鼠胚胎心肌细胞系H9c2为标本,建立3个时间点6、12、24h,以及四个不同浓度0、2、5、10%来检测细胞的自噬程度。运用Western Blot检测心肌细胞LC3Ⅱ、P62的变化,吖啶橙染色检测酸性膜泡。结果培养6h之前,较高浓度10%血清自噬程度最低,6~12h随着血清浓度增高自噬被促进。24h后去血清组促进自噬,添加2,5,10%血清均能抑制自噬。结论在筛选促进自噬的因子时,应选择背景自噬较低的模型,作用效果在6h之内的因子首选10%血清培养的心肌细胞,作用效果在6~12h之间的选择无血清培养体系,作用效果在24h之后的可选择有血清培养体系。
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