睾丸特异蛋白Y基因(TSPY)对奶牛早期胚胎性别的鉴定

黄金明; 王长法; 李建斌; 仲跻峰; 《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：为方便性别鉴定方法在现场应用,利用睾丸特异蛋白基因(TSPY)建立了奶牛早期胚胎的非电泳性别鉴定方法。设计并合成了TSPY雄性特异和雌、雄共有基因引物,并利用已知性别的奶牛血液DNA为模板,初步建立了性别鉴定的PCR反应体系和非电泳的性别鉴定方法。灵敏度试验结果显示,雄性特异引物和共有基因引物对在模板10～60pg时,其性别鉴定的准确率为100%,提示TSPY基因具备鉴定胚胎性别的可能;同时采用非电泳法和环介导的等温扩增(LAMP)法鉴定6枚胚胎的性别,两者结果完全一致;用非电泳法检测TSPY基因鉴定了43枚胚胎的性别,对其中鉴定为雌性的21枚胚胎分别移植给自然发情后6～8天的受体,结果9头出生的犊牛均为母牛。结果表明,TSPY基因是一个很好的雄性特异标记,非电泳检测TSPY基因对奶牛早期胚胎性别的鉴定结果准确可靠。

关键词： 奶牛胚胎 性别鉴定 睾丸特性蛋白Y基因(TSPY) PCR