文献类型: 中文期刊
作者: 黄金明 1 ; 王长法 1 ; 李建斌 1 ; 仲跻峰 1 ;
作者机构: 1.山东省农业科学院奶牛研究中心
关键词: 奶牛胚胎;性别鉴定;睾丸特性蛋白Y基因(TSPY);PCR
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1006-1304
年卷期: 2009 年 17 卷 03 期
页码: 73-78
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为方便性别鉴定方法在现场应用,利用睾丸特异蛋白基因(TSPY)建立了奶牛早期胚胎的非电泳性别鉴定方法。设计并合成了TSPY雄性特异和雌、雄共有基因引物,并利用已知性别的奶牛血液DNA为模板,初步建立了性别鉴定的PCR反应体系和非电泳的性别鉴定方法。灵敏度试验结果显示,雄性特异引物和共有基因引物对在模板10~60pg时,其性别鉴定的准确率为100%,提示TSPY基因具备鉴定胚胎性别的可能;同时采用非电泳法和环介导的等温扩增(LAMP)法鉴定6枚胚胎的性别,两者结果完全一致;用非电泳法检测TSPY基因鉴定了43枚胚胎的性别,对其中鉴定为雌性的21枚胚胎分别移植给自然发情后6~8天的受体,结果9头出生的犊牛均为母牛。结果表明,TSPY基因是一个很好的雄性特异标记,非电泳检测TSPY基因对奶牛早期胚胎性别的鉴定结果准确可靠。
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