科研产出
棉花GhSAP基因的克隆、分析及互作蛋白的筛选
《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:器官大小是植物重要的形态性状之一.为解析棉花GhSAP在调控器官大小方面的功能及机制,我们对该基因的基本生物学特性、亚细胞定位及其互作蛋白进行了系统分析.结果显示,GhSAP含有3个WD40 repeat功能区,具有两个外显子和一个内含子.亚细胞定位结果显示,GhSAP-GFP荧光信号与DAPI共定位在细胞核上.利用酵母双杂交技术共筛选到40个GhSAP的互作蛋白,结合转录组测序结果和基因功能分析,发现Gh_D06G0323(GhAUF1)与GhSAP共表达,推测GhAUF1可能与GhSAP互作共同调控棉花器官的发育.本研究对GhSAP基因进行了深入分析,为进一步揭示植物器官大小调控机制提供了依据.
关键词: 棉花(Gossypium hirsutum L.) GhSAP 亚细胞定位 酵母双杂交
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花生MAPK13基因的克隆及表达分析研究
《花生学报 》 2019
摘要:为了挖掘花生抗果腐病相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,从花生果腐病转录组文库中筛选出促丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)基因编码区序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMAPK13基因.结果表明AhMAPK13基因序列全长1818 bp,含有3'非编码区593 bp,5'非编码区122 bp,开放阅读框全长1104 bp,编码1条含有368个氨基酸的蛋白序列.预测其分子量为42.5kDa,含有MAPK家族典型的11个结构域,属于MAPK基因家族B组成员.亚细胞定位显示AhMAPK13定位于细胞质和细胞核中.RT-qPCR分析发现AhMAPK13基因在茎中表达量高于其他组织,说明该基因具有组织表达特异性;AhMAPK13基因受干旱、低温、NaCl、ABA诱导时表达量上升,说明该基因可能广泛参与植物非生物胁迫响应过程;AhMAPK13基因受JA、GA、ET、SA诱导时表达量上调,说明该基因可能参与到这些激素介导的抗逆信号转导途径.本研究结果为花生抗果腐病育种研究提供了新的基因资源.
关键词: 花生 促丝裂原蛋白活化激酶基因13 基因克隆 表达分析 亚细胞定位
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花生Ah MKK4基因的克隆、表达分析和亚细胞定位研究
《核农学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为挖掘花生抗逆相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,根据cDNA文库中已知的促丝裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)基因EST序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到Ah MKK4基因.结果表明,Ah MKK4基因序列全长1 434 bp,含有3'非编码区151 bp,5'非编码区317 bp,开放阅读框全长966 bp,编码一条含有322个氨基酸的蛋白序列.预测其分子量为36. 74 k Da,属于MAPKK基因家族D组成员.亚细胞定位显示Ah MKK4基因定位于细胞质和细胞核中.RT-qPCR分析发现,AhMKK4基因在根中表达量高于其他组织,说明该基因具有组织表达特异性; Ah MKK4基因受JA和IAA诱导时表达量上调,受SA和ABA诱导时表达量下调,说明该基因可能参与到JA和IAA介导的信号转导途径;AhMKK4在盐胁迫下表达量上调,说明该基因可能参与花生对盐胁迫的适应性调控.本研究结果为花生抗逆育种研究提供了新的基因资源.
关键词: 花生促丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4) 基因克隆 表达分析 亚细胞定位
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