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共表达PRRSV ORF3及ORF5双基因核酸疫苗的制备方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所;青岛农业大学

发明人: 王金宝;任慧英;李俊;张秀美;温建新;周顺;李文立;张乐萃;宋春阳

专利号: CN200810013673.5

摘要: 本发明提供一种共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF3及ORF5双基因核酸疫苗的制备方法,该方法是通过RT-PCR方法分别扩增PRRSV ORF3及ORF5的全基因序列,并将2个基因插入哺乳动物真核表达载体pIRES的2个多克隆位点,获得重组质粒S-W-PIRES。将重组质粒转染COS1细胞,通过RT-PCR方法检测到PRRSV ORF3及ORF5基因的转录,通过免疫组化检测到目的蛋白的瞬间表达。该核酸疫苗可在动物体内持续不断的产生GP3蛋白及GP5蛋白,使机体不断产生针对两者的抗体及细胞免疫反应,对猪体提供持久的免疫保护力,在PRRS的防控中具有广阔的应用前景。

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