文献类型： 会议论文
第一作者： 黄兵
作者： 黄兵 1 ; 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 2 ; 马秀丽 1 ; 王莉莉 1 ; 李玉峰 1 ; 刘玉山 1 ; 陈溥言 3 ;
作者机构： 1.山东省农业科学院家禽研究所,山东,济南,250023
2.江苏,南京,210095
3.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
关键词： 禽流感病毒;血凝素基因;一步法RT-PCR;病毒分型;HA基因序列
会议名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会%中国免疫学会
页码： 93-95
摘要： 建立简便的一步法RT-PCR检测方法,对禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)分型进行了研究.参照AIV的HA基因序列设计了1对引物,对H9和H5亚型AIV的扩增产物大小分别为579bp和177bp,很容易通过凝胶电泳进行辨别.该引物与EDSV、NDV、IBV、IBDV、REV、REOV及SPF鸡肌肉组织的核酸无交叉反应,对Genebank收录的部分毒株HA序列的互补性分析结果进一步核实了检测引物的特异性.敏感性分析发现,从50pg的AIV总RNA中亦能检测到目的条带.这些结果表明,此次利用1对引物建立的一步法RT-PCR简便适用,可以在一个反应管中同时将H9和H5亚型AIV进行快速检测和分型.同时,两个亚型的扩增产物均包含了裂解位点在内的HA基因序列,可通过测序推导出氨基酸顺序以判定H5或H9亚型禽流感病毒的潜在毒力。
分类号： S852.659.1`S854.43
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