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嗜酸乳杆菌16s rRNA PCR检测方法的建立

文献类型: 会议论文

第一作者: 颜世敢

作者: 颜世敢 1 ; 朱丽萍 2 ; 常维山 3 ; 陆承平 4 ;

作者机构: 1.山东省农科院畜牧兽医研究所(济南)

2.山东轻工业学院食品与生物工程学院(济南)

3.山东农业大学动物科技学院(泰安)

4.南京农业大学动物医学院(南京卫岗)

关键词: 嗜酸乳杆菌;PCR检测方法;基因序列;核糖体RNA;细菌检测

会议名称: 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 964-967

摘要: 根据嗜酸乳杆菌16s rRNA保守区的基因序列,自行设计合成1对特异性扩增509bp目的片段的引物,上游引物为5′CAT AGC CGA GTT GAG AGA TG 3′,下游引物为5′ATC TAA TCC TGT TCG CTA CCC A 3′.通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测嗜酸乳杆菌的PCR方法.植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均为阴性;嗜酸乳杆菌参考株则可扩增出509bp的特异性条带.扩增产物序列分析表明扩增片段的序列与GENEBANK发表的参考菌的核苷酸序列符合率为99﹪.用建立的PCR方法对分离的嗜酸乳杆菌进行检测,同样获得与嗜酸乳杆菌参考株一致的目的条带.实验结果表明,建立的PCR方法能够特异的检测嗜酸乳杆菌.

分类号: S852.61

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