文献类型： 中文期刊

作者： 黄亦钧 ¹ ; 季金殿 ¹ ; 尤升波 ¹ ; 游银伟 ¹ ; 单成纲 ² ; 岳寿松 ¹ ;

作者机构： 1.山东省农业科学院高新技术研究中心

2.山东省农业科学院原子能研究所

关键词： 嗜麦芽窄食假单胞菌YHJ-1;转座子突变;插入突变体文库

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 05 期

页码： 191-196

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 嗜麦芽窄食假单胞菌(Streptinomonas maltophilia)YHJ-1是一株能高效降解羽毛角蛋白的菌株;该菌对卡那霉素等多种抗生素不敏感。利用携带Tn5转座酶和卡那霉素抗性转座质粒pRL27和含氯霉素抗性基因盒的pMCm质粒,构建了以氯霉素抗性作为选择标记的转座质粒pRH30。以大肠杆菌(Escherichia coli)UQ3021/pRH30为供体,通过双亲本杂交,构建了S.maltophilia YHJ-1的插入突变体文库,该库共含1246个转化子。随机挑选4个突变子经氯霉素抗性和PCR分析检测,结果显示突变体均有氯霉素抗性和氯霉素抗性基因,表明文库是可靠的。已从文库中筛选出3株不能降解羽毛转化子,表明利用氯霉素抗性的转座质粒pRH30构建菌株YHJ-1的突变体是克隆其相关基因并进行遗传分析的有效方法。