文献类型： 中文期刊

作者： 庞运倩 ¹ ; 马秀丽 ² ; 刘爱玲 ³ ; 刘华雷 ⁴ ; 黄兵 ² ; 宋敏训 ² ; 胡敬东 ¹ ;

作者机构： 1.山东农业大学动物医学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室

2.山东省农业科学院家禽研究所

3.山东师范大学生命科学学院

4.中国动物卫生与流行病学中心

关键词： ISG12;基因表达;禽流感病毒;病毒复制

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2016 年 36 卷 06 期

页码： 938-943

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 干扰素刺激基因12(interferon-stimulated gene 12,ISG12)在病毒感染过程中已经被监测到,但是针对其抗病毒活性的研究却很少。本研究的主要目的是体外表达鸡的ISG12基因,以禽流感病毒(avian influenza viru,AIV)1215株为病毒模型,利用细胞培养检测其抗病毒活性。利用RT-PCR方法扩增鸡胚成纤维细胞(CEF)的ISG12基因,经测序分析,该基因序列与GenBank中登录的禽属ISG12基因序列相似性为100%。将该基因亚克隆至pET-32a载体构建重组原核表达质粒p32a-C12;工程菌p32a-C12/BL21经IPTG诱导表达,重组蛋白经Ni 2+琼脂糖凝胶柱层析纯化,获得相对分子质量约30 000的目的蛋白。利用ISG12蛋白预处理CEF和鸡外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)后感染AIV 1215株,或者将该病毒与ISG12蛋白一起接种CEF细胞和PBL细胞,AIV在CEF中的复制能力与对照组无明显差异,而ISG12蛋白预处理鸡PBL细胞和同时感染AIV 1215株时的病毒含量均比对照低。体外抗病毒活性试验表明,ISG12蛋白能够抑制AIV 1215株在PBL细胞中的复制,但在CEF细胞上的作用不明显。