文献类型： 中文期刊
作者： 亓丽红 1 ; 艾武 1 ; 黄兵 1 ; 刘涛 1 ; 秦卓明 1 ; 宋敏训 1 ;
作者机构： 1.山东省农业科学院家禽研究所山东省禽病诊断与免疫重点实验室
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒;S1基因;毕赤酵母;表达;免疫原性
期刊名称： 浙江农业学报
ISSN： 1004-1524
年卷期： 2010 年 22 卷 05 期
页码： 585-589
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9K-S1-GS115。将重组菌在0.5%甲醇中进行诱导分泌表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western blot分析。结果显示,在酵母培养基上清中检测到分子量为90 ku为目的蛋白,与鸡IBV阳性血清发生特异性反应。将表达上清及其重组菌菌体饲喂SPF鸡,40 d后采血,可检测到IBV保护性抗体。结果表明:表达的IBV的S1蛋白具有很好的免疫原性,为ELISA诊断试剂盒的研制及IBV疫苗的研制奠定基础。
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