文献类型： 中文期刊

作者： 张太翔 ¹ ; 王炳军 ² ; 凌宗帅 ² ; 李玉峰 ³ ; 高小博 ⁴ ; 田国宁 ¹ ; 张金玲 ¹ ; 韩亮 ¹ ; 张丽萍 ¹ ;

作者机构： 1.潍坊出入境检验检疫局

2.济南出入境检验检疫局

3.山东农科院家禽所

4.北京盈九思科技发展有限公司

关键词： 鸡传染性贫血;实时荧光定量PCR;Taqman探针

期刊名称： 中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2009 年 26 卷 11 期

页码： 58-60

摘要： 建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测鸡传染性贫血病毒(CAV)。选取CAV病毒的序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有CAV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。2.0×105～2.0×102个拷贝,4个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为200个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒和马立克病毒核酸都没有扩增反应。采用实时荧光定量PCR方法检测试验感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊、泄殖腔棉拭子等样品,所有检测样品都有"S"型扩增曲线,且荧光信号值高。实时定量PCR检测CAV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义。