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拟南芥和烟草幼嫩种子RNA不同提取方法的比较

文献类型： 中文期刊

作者： 谢传胜 1 ; 宋国琦 2 ; 王兴军 1 ; 夏晗 2 ; 赵传志 2 ; 毕玉平 2 ;

作者机构： 1.山东师范大学生命科学学院

2.山东省农业科学院高新技术中心

关键词： 拟南芥;烟草;幼嫩种子;RNA提取

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2009 年 25 卷 23 期

页码： 78-81

收录情况： 北大核心

摘要： 拟南芥和烟草在植物分子生物学研究中都占有非常重要的地位,为了后续试验的顺利进行,欲探索适合提取拟南芥及烟草幼嫩种子总RNA的经济快捷的方法。采用4种方法分别对拟南芥和烟草幼嫩种子的总RNA进行了提取和分析,3种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作。Trizol法提取的RNA质量低。CTAB-异丙醇法提取的总RNA产量最高,并具有提取步骤少,操作时间短,价格便宜等优点,可用于大量样品提取;百泰克试剂盒提取时间短,可在常温下操作;CTAB-LiCl法提取的总RNA基本无基因组DNA的污染,但是不利于小分子RNA的沉淀。经紫外分光光度计检测,3种方法提取的总RNAOD260/OD280均在1.80~1.97,表明蛋白质及其他有机溶剂的污染很少,OD260/OD230在2.03~2.37,表明盐类小分子的污染也较少;电泳检测28S rRNA和18S rRNA条带清晰,28S rRNA的亮度基本为18SrRNA的2倍,所提取的总RNA质量较高。将CTAB-异丙醇法提取的拟南芥总RNA用于反转录,可获得高质量的cDNA,ds cDNA清晰的分布在100~3000 bp之间。

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