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新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 于可响 1 ; 马秀丽 1 ; 韩宏宇 1 ; 刘存霞 1 ; 李玉峰 1 ; 黄兵 1 ; 宋敏训 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院家禽研究所

关键词: 新型鸭呼肠孤病毒;S3基因;一步反转录环介导等温扩增

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2015 年 31 卷 08 期

页码: 71-75

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 建立适于基层实验室快速检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法。基于新型鸭呼肠孤病毒S3基因的6个保守区域设计了4条LAMP引物,利用Bst DNA聚合酶在63℃恒温保持45 min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了RT-LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,除NDRV外对其他6种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对病毒RNA的最低检出量为0.1 pg,是常规RT-PCR方法的100倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为98%,而且对仪器的要求低,适于基层实验室和现场检测。

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