文献类型： 中文期刊

作者： 杨少艳 ¹ ; 于可响 ² ; 王华 ² ; 史玉颖 ² ; 马秀丽 ² ; 李建亮 ¹ ; 崔言顺 ¹ ;

作者机构： 1.山东农业大学动物科技学院

2.山东省农业科学院家禽研究所

关键词： 鸭坦布苏病毒;E基因;表达;间接ELISA

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2012 年 24 卷 05 期

页码： 782-786

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR方法从鸭坦布苏病毒山东分离株(BZ株)扩增整个E基因,全长1 503 bp,克隆到pMD18-T载体中,然后将双酶切目的片段亚克隆入pET-28a(+)载体,构建出重组表达质粒PET28a-E。将PET28a-E转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导可表达出分子量约54.8 kD的蛋白,Western blotting试验呈阳性,表明E蛋白有很好的反应原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,鸭坦布苏病毒血清为一抗,HRP标记的羊抗鸭IgG为二抗建立间接ELISA方法。采用该方法对80份送检鸭血清进行检测,并与中和试验进行比较,结果显示,两者的符合率为95.0%,表明该方法具有较好的应用前景。