文献类型： 中文期刊

作者： 李燕乐 ¹ ; 钟怀荣 ² ; 宣宁 ² ; 张燕 ² ; 陈高 ² ; 季祥 ¹ ;

作者机构： 1.内蒙古科技大学生命科学与技术学院内蒙古自治区生物质能源化利用重点实验室

2.山东省农业科学院农作物种质资源研究所山东省作物遗传改良与生态生理重点实验室

关键词： 集胞藻PCC6803;磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶;脂肪酸;同源重组

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 1316-1325

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶（phosphopantetheinyl transferases, PPTase）是细菌脂肪酸合成中的关键酶。本研究利用同源重组手段构建集胞藻PCC6803 PPTase基因（slr0495）过量表达重组质粒，在集胞藻PCC6803中进行表达研究，并在DNA和RNA水平进行验证，同时利用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）检测不同条件下突变藻株脂肪酸组分及含量。结果表明：在温度为30℃、光照强度为50μmol·m^-2·s^-1的培养条件下，过量表达slr0495基因突变藻株中C12:0、C16:0和C18:0的含量分别为1.31 mg·g^-1、8.07 mg·g^-1和1.35 mg·g^-1,比野生型藻株分别提高了23.58%、25.31%和13.45%;在温度为20℃、光照强度为50μmol·m^-2·s^-1、50%NaNO₃的培养条件下，与野生型相比，突变藻株中C16:0和C18:0含量分别提高了44.71%和41.51%。以上结果表明，过量表达slr0495基因增加了集胞藻PCC6803中长链饱和脂肪酸的含量，并且在低温（20℃）和缺氮（50%NaNO₃）双重胁迫培养条件下中长链饱和脂肪酸含量得到进一步提高。本研究为探究slr0495基因功能以及在逆境中基因产生的应激反应提供了理论依据，为微藻高产多不饱和脂肪酸代谢研究奠定了基础。