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犬瘟热病毒水貂分离株F基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 袁小远 1 ; 单虎 2 ; 王志亮 3 ; 李俊 4 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院家禽研究所

2.莱阳农学院动物科技学院

3.农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心

4.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 犬瘟热病毒;水貂;F基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 09 期

页码： 671-674

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录的犬瘟热病毒F基因序列设计了1对引物,以从水貂犬瘟热病毒中提取的RNA为模板,扩增出一约1 000 bp的F基因片段。将PCR产物按相应的阅读框架克隆到原核表达载体pET-32a中,并将重组质粒转化E.coliBL21(DE3),用1.0 mmol/L IPTG在30℃下诱导表达。结果显示,F基因的表达量约占细菌总蛋白的35%。SDS-PAGE电泳显示,表达产物的分子质量约为55 ku,与预计大小相符;经Western-blotting试验进一步证实,该基因获得了正确表达。

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