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嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究

文献类型: 中文期刊

作者: 宋艳华 1 ; 张燕 1 ; 胡波 1 ; 范志宇 1 ; 魏后军 1 ; 刘星 1 ; 黄兵 2 ; 薛家宾 1 ; 徐为中 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.山东省农业科学院家禽研究所

关键词: RHDV;衣壳蛋白;OVA T细胞表位;嵌合蛋白;免疫原性研究

期刊名称: 安徽农业科学

ISSN: 0517-6611

年卷期: 2015 年 43 卷 32 期

页码: 89-92

摘要: 为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利用透射电镜观察VLPs的形成,发现均可形成形态大小与VP60相似的VLPs。将3种嵌合蛋白分别腹腔注射C57BL/6雌性小鼠,利用间接ELISA检测首免后0、4和6周小鼠血清样品中VP60特异性抗体,结果表明嵌合蛋白组与VP60组均能够诱导产生较高水平的抗VP60特异性抗体,2组间无显著差异。首免后6周,利用合成的OVA多肽刺激脾淋巴细胞,ELISPOT检测特异性IFN-γ的分泌水平,结果表明3种嵌合蛋白均能诱导特异性IFN-γ的分泌。该研究扩展了VP60作为载体可携带的外源片段的耐受性及有效递呈T细胞表位的能力,为VP60-VLPs展示系统的研究提供了理论依据。

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