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马铃薯卷叶病毒CP基因水溶性原核表达的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 牛倩雅 1 ; 辛佳 1 ; 王晶珊 1 ; 杨煜 2 ; 李广存 2 ; 郭宝太 1 ;

作者机构： 1.青岛农业大学生命科学学院

2.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所

关键词： 马铃薯卷叶病毒;CP基因;分子伴侣;冷激蛋白启动子;原核表达;重组蛋白;水溶性

期刊名称： 中国蔬菜

ISSN： 1000-6346

年卷期： 2015 年 12 期

页码： 28-32

收录情况： 北大核心

摘要： 采用两种策略增强了马铃薯卷叶病毒(PLRV)CP基因的水溶性原核表达。首先,用5种可表达出分子伴侣的质粒分别转化重组菌TOP10(p BAD-LRCP),获得了既含p BAD-LRCP又含分子伴侣质粒的转化子;诱导转化子中PLRVCP基因与分子伴侣基因同时表达,SDS-PAGE结果表明,从转化子提取的水溶性蛋白中有明显的PLRV重组CP条带,即分子伴侣增进了重组CP的水溶性表达。其次,将PLRV-CP基因定向插入p ColdⅠ中构建了该基因的冷激诱导原核表达载体p Cold-LRCP,15℃、IPTG诱导24h,SDS-PAGE分析表明,从重组菌BL21(p Cold-LRCP)提取的上清蛋白中有明显的PLRV重组CP条带。试验结果表明,分子伴侣与冷激蛋白基因csp A的启动子均可提高PLRV-CP基因的水溶性表达,且后者的表达水平高于前者。

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