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基因C型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 赵立娜 1 ; 崔言顺 1 ; 任建亭 2 ; 李建亮 1 ; 黄兵 3 ; 李玉峰 3 ; 马秀丽 3 ;

作者机构： 1.山东农业大学动物医学院

2.山东省东营市广饶县中等专业中学

3.山东省农业科学院家禽研究所

关键词： 鸭肝炎病毒;基因C型;VP1基因;克隆表达;多克隆抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2011 年 23 卷 02 期

页码： 258-262

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法,扩增基因C型DHV JFX08株的VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建新型DHVVP1基因克隆重组质粒。然后将VP1基因定向插入到pET-32a(+)表达载体中,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析表明,基因C型DHV-VP1基因可在大肠杆菌中稳定高效的表达。Western-blot检测表明,表达产物可与基因C型DHV阳性血清发生特异性反应。将纯化的重组蛋白免疫4周龄SPF鸡,以纯化的VP1重组蛋白和基因C型DHV全病毒分别包板,制备的抗血清ELISA效价分别可达1∶25 600,1∶51 200,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。

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