文献类型： 中文期刊

作者： 王婷婷 ¹ ; 王希辉 ² ; 范忠玲 ³ ; 陈金龙 ⁴ ; 曹丙蕾 ⁵ ;

作者机构： 1.中国农业大学食品科学与营养工程学院

2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东农业大学动物科技学院

3.山东省肉类食品质量控制工程技术研究中心

4.山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心

5.山东农业大学动物科技学院

关键词： 山羊IL-18;杆状病毒;昆虫细胞;生物学活性

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2011 年 27 卷 02 期

页码： 173-176

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:在昆虫细胞/杆状病毒中表达山羊白介素18(gIL-18)成熟蛋白,并对其生物学活性进行分析。方法:将编码山羊白介素18(gIL-18)成熟蛋白的基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac Dual上,构建重组质粒pFastBac Dual-gIL18,将该重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-gIL18,在Cellfectin作用下,将Bacmid-gIL18转染昆虫细胞sf9,收获感染后不同时间段的细胞,进行SDS-PAGE、Western blot检测和生物学活性分析。结果:重组蛋白获得正确表达具有良好的免疫原性;生物学活性分析表明,重组蛋白能够促进淋巴细胞增殖、诱导淋巴细胞分泌IFN-γ。结论:用昆虫细胞/杆状病毒系统成功表达了gIL-18成熟蛋白,且具有良好的免疫原性和生物学活性,从而为进一步研究gIL-18作为免疫调节剂和免疫佐剂在生产上的应用奠定了基础。