文献类型： 中文期刊
作者： 高凤 1 ; 于可响 2 ; 马秀丽 2 ; 李玉峰 2 ; 王友令 2 ; 李建亮 1 ; 崔言顺 1 ;
作者机构： 1.山东农业大学动物科技学院
2.山东省农业科学院家禽研究所
关键词： 鸭黄病毒;实时荧光定量RT-PCR;TaqMan探针
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2013 年 33 卷 01 期
页码： 16-19
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据鸭黄病毒E蛋白基因序列设计了1对特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量RT-PCR检测鸭黄病毒的方法。根据含鸭黄病毒目的扩增片段的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线(Y=-3.39 X+43.18,r=0.973)。该方法具有特异性,对鸭病毒性肝炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒、鸭瘟病毒、猪乙脑病毒的核酸都没有扩增反应。敏感性试验显示,建立的此方法最低可检出1.9个TCID50病毒核酸。该方法对5只健康雏鸭人工感染86h后的组织器官样品(盲肠扁桃体除外)的检测结果均为阳性,与病毒分离鉴定的阳性符合率为100%。结果表明,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过3h,为鸭黄病毒病提供了一种敏感特异的定量检测方法。
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