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萝卜EST-SSR标记PCR反应体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 付卫民 1 ; 王淑芬 2 ; 王秀峰 1 ; 何启伟 2 ; 刘贤娴 2 ; 韩晓雨 1 ;

作者机构: 1.山东农业大学园艺科学与工程学院

2.山东省农业科学院蔬菜研究所/山东省设施蔬菜生物学重点实验室/国家蔬菜改良中心山东分中心

关键词: 萝卜;EST-SSR;PCR;体系优化

期刊名称: 长江蔬菜

ISSN: 1001-3547

年卷期: 2012 年 22 期

页码: 13-15

摘要: 采用L16(45)正交试验设计优化了萝卜EST-SSR标记的PCR反应体系,建立了适于20μL PCR技术体系的最佳浓度:DNA模板65 ng/20μL,Mg2+0.8 mmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.8μmol/L,Taq DNA酶0.4 U/20μL,且Mg2+对该体系的影响最大。利用10对EST-SSR引物对该体系的验证结果表明,本研究建立的萝卜EST-SSR PCR体系重复性好、条带清晰、多态性丰富,对萝卜的种质资源的鉴定与评价、分子标记辅助选择育种等多方面都有重要作用。

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