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MDCK细胞ISG15基因的克隆表达及抗病毒活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘爱玲 1 ; 潘杰 1 ; 庞运倩 2 ; 于可响 3 ; 马秀丽 3 ; 宋敏训 3 ;

作者机构: 1.山东师范大学

2.山东农业大学

3.山东省农业科学院

关键词: ISG15;MDCK细胞系;抗病毒活性;H9N2

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2015 年 27 卷 02 期

页码: 154-159

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了解ISG15基因体外抗病毒机制,应用RT-PCR方法扩增了MDCK细胞的ISG15基因,经测序分析,该基因序列与Gen Bank中登录的犬属ISG15基因序列相似性为99%。将该基因亚克隆至p ET-28a载体构建出重组原核表达质粒p28a-M15;工程菌p28a-M15/BL21经IPTG诱导表达,获得了约22 k D的重组目的蛋白,重组蛋白经Ni2+柱层析纯化。于H9N2亚型禽流感病毒S2株感染前后在MDCK细胞中定量加入纯化的ISG15蛋白,结果显示,病毒感染MDCK细胞前加入ISG15蛋白可以抑制病毒的复制,但病毒感染后添加该蛋白则促进了病毒的复制。

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