文献类型： 中文期刊

作者： 解盈盈 ¹ ; 李军 ¹ ; 汪冰 ¹ ; 于雅萌 ¹ ; 栾永福 ¹ ; 梅桂雪 ¹ ; 张全芳 ¹ ; 戴忠 ¹ ; 林永强 ¹ ;

作者机构： 1.山东省食品药品检验研究院国家药监局胶类产品质量评价重点实验室山东省中药标准创新与质量评价工程实验室;山东省农业科学院生物技术研究中心应用生命科学实验室;中国食品药品检定研究院

关键词： DNA条形码;聚合酶链式反应(PCR)法;蚂蟥;混伪品;蚂蟥粉

期刊名称： 中国药事

ISSN： 1002-7777

年卷期： 2023 年 01 期

页码： 48-58

摘要： 目的：建立蚂蟥特异性PCR鉴别方法，能够快速准确地鉴别蚂蟥与其常见伪品。方法：通过分析蚂蟥与其常见伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）序列，寻找蚂蟥SNP变异位点，设计特异性引物；通过对退火温度、循环次数、DNA模板量及Taq酶等关键因素的考察，确立最优反应体系及条件，并将特异性PCR方法应用到水蛭（蚂蟥）粉末中进行药材粉末的基原鉴别，同时为保证试验结果的准确性，将PCR扩增产物进行一代测序。结果：特异性PCR结果表明蚂蟥在400～600 bp有单一明亮条带，常见混伪品则无此条带，试验结果与一代测序结果一致，为蚂蟥。结论：该方法能够将蚂蟥与其常见伪品菲牛蛭、东北小水蛭、黑条、小黑条等区别，且能鉴别水蛭（蚂蟥）粉的基原，为提升中药监管力度，打击中药掺伪行为提供了强有力的技术支持。