科研产出
“二氧化氯泡腾片”对家禽主要病原微生物杀灭效果试验
《家禽科学 》 2012
摘要：为了观察"二氧化氯泡腾片"对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、禽流感H9亚型病毒及鸡新城疫病毒的杀菌及杀病毒效果,采用悬液定量杀菌试验和通过固定病毒稀释消毒液法进行实验室观察。结果:二氧化氯5mg/L作用5min即可对大肠杆菌临床分离株产生100%的杀菌效果。二氧化氯5mg/L作用10min或二氧化氯10mg/L作用5min均能对金黄色葡萄球菌临床分离株产生100%的杀菌效果。2mg/L二氧化氯就能对103EID50新城疫病毒有100%的杀灭作用,而1mg/L不能全部杀灭新城疫病毒。禽流感病毒H9亚型对二氧化氯比新城疫病毒敏感,1mg/L二氧化氯即可对103EID50禽流感病毒H9有较好的杀灭作用。结论:"二氧化氯泡腾片"是一种方便、高效的消毒剂,在较低的浓度条件下,就能对家禽主要病原微生物有杀灭效果。
关键词： 二氧化氯泡腾片 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 鸡新城疫病毒 H9禽流感亚型病毒 杀灭效果
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家禽大肠杆菌分型方法研究进展
《家畜生态学报 》 2011
摘要：大肠杆菌感染是家禽在集约化养殖下经常爆发并迅速传播的一种疾病。该病能引起家禽局部或全身性感染,给广大养殖户带来巨大的经济损失。大肠杆菌既是家禽体内的正常菌群又是致病菌,不同类型的大肠杆菌其致病力不同。论文回顾了大肠杆菌目前常用的分型方法,包括常规的血清学分型,生化分型、药敏实验分型以及近年来随着生物学发展新兴的质粒图谱分型和脉冲场分型等,并就大肠杆菌现有的分型方法做一简要阐述,希望能为更好地研究和预防该病的发生,为确定不同菌株之间的关联性、细菌传染源的追踪和寻找传播途径提供更好、更合适的方法做参考。
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用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株
《中国科学:生命科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板:将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.
关键词： 线性梯度平板 E.coli 恩诺沙星 MIC 抗性菌
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奶牛乳腺炎源性大肠杆菌csgC基因的克隆及载体构建
《中国兽医学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank上发表的curli菌毛csgC基因序列设计了1对特异性引物。从患乳腺炎的奶牛乳汁中分离出致病性大肠杆菌,经生物学鉴定后,提取全基因组DNA为模板,PCR扩增出csgC基因,连入pMD18-T克隆载体,测序,结果表明,扩增片段含有333个核苷酸,编码111个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的大肠杆菌W3110的全基因组DNA中的csgC基因序列最相近,氨基酸序列同源性为99.7%。该基因与原核表达载体pET32a+相连,转入BL21(DE3)感受态细胞。挑选阳性菌落经PCR鉴定和酶切鉴定后表明成功构建原核表达载体pET32a+/csgC。
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恩诺沙星对大肠杆菌全基因组表达谱的影响
《畜牧兽医学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为探索恩诺沙星(Enrofloxacin)压力下大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)生理状态的变化,从而为进一步研究细菌对药物压力的应答机制提供参考,作者将E.coli接种于加入恩诺沙星(浓度为1/2 MIC)的液体LB中,绘制生长曲线,分别以光镜和电镜进行形态学观察,取5 h培养菌,进行表达谱差异分析。结果显示,加入恩诺沙星后细菌生长速度明显降低(P<0.01),菌体形态呈长丝状,基因芯片检测发现519个差异点,其中239个上调,而280个下调,表达变化3倍以上的基因66个,其中34个上调,32个下调,主要涉及SOS应答、细胞分裂、压力应答、物质合成、新陈代谢、转录调控等生物学功能。上述结果表明,在恩诺沙星压力下,细菌启动SOS应答,细胞分裂被抑制,细菌生理机制发生了复杂的变化。
关键词： 恩诺沙星 表达谱基因芯片 大肠杆菌 细菌形态 转录分析
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大通量的抗生素药敏检测盒的设计及应用
《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心
摘要：基于琼脂稀释法,设计制作了96点阵抗生素药敏检测盒。以NCCLS(2007)抗生素最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)微量稀释法为对照,测定了分离自规模化猪场饲养员和幼儿园、中学学生的98株大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星和中药三黄汤的药物敏感性。结果表明,两种方法测定的最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)、MIC都表现高度对称,其差值的平均值都在一倍稀释度内,在差值0.5μg/mL范围内都达到90%以上的符合。MBC与MIC高度相关,r=0.94～0.99。这些指标说明两种方法测定的MBC与MIC平行性好。以总体的抗生素敏感性频率比较,两种方法测定值也很相近,符合率为93.93%。本检测盒还可以准确测定中药三黄汤对大肠杆菌的MIC(125～500mg/mL)。96点阵抗生素药敏检测盒是适合于实验室进行大规模抗药性监测的新工具,具有简易、准确、快速、大通量、节约的优点。配合96孔培养板,一次可以测定96株病原菌对一种抗生素或中药的敏感性。
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山东地区鸡源性大肠杆菌的耐药性与质粒图谱的监测分析
《家禽科学 》 2009
摘要：对来源于山东各地自然发病鸡群的19株鸡源致病性大肠杆菌进行了耐药性和质粒图谱检测,并对菌株耐药性与质粒图谱间关系进行了分析研究。结果表明:19株鸡源致病性大肠杆菌均具有多重耐药性,耐药图谱复杂;除3株菌没有提取到质粒外,其余菌株均提取到质粒条带1～5条;对比分析发现,菌株耐药性与所携带质粒的数量和大小并无直接的相关性。
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大肠杆菌在恩诺沙星作用下形态的变化
《潍坊医学院学报 》 2009
摘要：目的观察大肠杆菌在恩诺沙星作用下菌的形态变化,为临床诊断提供依据。方法利用荧光染色剂与流式细胞术相结合技术观察丝状菌的情况,利用激光共聚焦扫描显微镜观察丝状菌内的核酸情况。结果大肠杆菌在恩诺沙星药物作用下,变成丝状菌,且直径也明显增加,随着药物浓度增加,活菌数量明显减少。结论通过对菌连续的观察和进一步实验,证实了丝状菌的形成过程。丝状菌抗药性明显增加。
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不同宿主大肠杆菌对15种抗生素抗药性差异研究
《山东农业科学 》 2009
摘要：采用96孔板微量肉汤稀释法,测定SPF鸡、商品肉鸡、鸡场饲养员、医院病人等不同宿主粪样140株大肠杆菌对15种抗生素的抗药性,比较不同用药环境下大肠杆菌的抗药性差异。结果表明:SPF鸡分离菌株的抗药性最低,平均抗药性频率为46.08%,大部分菌株对8～9种抗生素存在低水平抗药性。医院病人大肠杆菌平均抗药性频率达到67.47%,多数菌株对12～13种抗生素产生抗药性。由于商品鸡场大量使用抗生素,鸡场饲养员和肉鸡分离株平均抗药性频率远高于SPF鸡,分别达80.00%和72.27%,并对12～13种抗生素产生抗药性,其中对磺胺二甲嘧啶、利福平的抗药性频率都在90%以上。建议测定区域使用抗药性频率低于50%的抗生素:头孢唑啉、头孢噻呋、硫酸黏菌素、阿米卡星。
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多重抗药大肠杆菌中Ⅰ型整合子的分布与抗药关系
《中国人兽共患病学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：目的检测多重抗药大肠杆菌中检测Ⅰ型整合子的携带率及其对细菌抗药性的影响。方法用大肠杆菌显色培养基分离奶牛场、猪场和肉鸡场的565株大肠杆菌,测定其对15种抗生素的MIC;用PCR扩增其中91株多重抗药性(最少耐3种抗生素)菌株的Ⅰ型整合酶基因及抗药基因盒。结果565株大肠杆菌仅对头孢噻呋、阿米卡星和硫酸粘菌素的抗药率低于50%,其余药物均表现出较高抗药率,且几乎所有细菌都对3种以上抗生素具有抗性。91株多重抗药大肠杆菌Ⅰ型整合子的平均检出率为83.52%,大多数整合aadA基因和dhfr基因,抗药性基因携带率为43.42%。结论Ⅰ型整合子对细菌多重抗药性的产生和传播起着重要作用,是临床细菌多重抗药性监测在基因水平的重要指标。
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