科研产出
水稻丙二烯氧化物合成酶基因OsAOS1的表达研究
《山东农业科学 》 2013
摘要：茉莉酸(Jasmonate,JA)为植物病虫害抗性反应中重要的信号分子,茉莉酸类物质生物合成途径中的关键酶为丙二烯氧化物合成酶(Allene oxide synthase,AOS).已知水稻AOS基因家族包括4个成员,Os-AOS1~OsAOS4.已有研究表明,水稻OsAOS2基因的过量表达提高了内源PR1基因的表达、增强了水稻对稻瘟病的抗性.本研究分析了OsAOS1基因表达的组织和器官特异性以及外源JA处理对OsAOS1基因表达的影响,同时利用转基因技术研究了OsAOS1基因在调控内源PR1基因表达中的作用.研究结果表明:OsAOS1基因表达的组织和器官特异性不同于OsAOS2基因;外源JA处理诱导OsAOS1基因的瞬时表达,然而OsAOS2基因的诱导表达延迟;OsAOS1过量表达抑制烟草中内源PR1基因的表达.据此推测OsAOS1基因可能不参与依赖于PR1的抗病反应.
关键词： 水稻 茉莉酸 丙二烯氧化物合成酶 转基因 PR1基因
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利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：植物类受体蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用。在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK。利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK。进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1-StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株。用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1-StRLK成功转入ED13。以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1-StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据。
扩张蛋白Swollenin基因香菇表达载体构建及其初步转化
《食品科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：构建含有Swollenin基因(swo基因)的香菇表达载体,并通过PEG(polyethylene glyeol)介导的原生质体转化法实现对香菇的遗传转化,转化效率约为1个转化子/μg质粒DNA。PCR和杂交检测结果表明,swo基因已经整合到香菇的基因组中;栽培实验结果表明,两个转化子都能正常出菇,而且转化子Ⅱ表现出优良的生物学性状,将swo基因转化到香菇中对香菇新品种的培育进行探索。
关键词： 香菇 Swollenin基因 表达载体 遗传转化
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根癌农杆菌介导的苹果遗传转化研究进展
《中国农学通报 》 2010 北大核心
摘要：自1986年首次获得苹果转基因植株以来,苹果遗传转化的研究发展极为迅速,用于苹果遗传转化研究的基因型也越来越多。在苹果上进行遗传改良的主要方法是农杆菌介导的遗传转化法。从农杆菌介导的转化过程入手,探讨了农杆菌菌株类型、农杆菌Vir基因诱导物的加入、受体材料的生理状态等方面综述了影响农杆菌转化苹果的各个因素,指出今后的研究重点应放在新的转化方法的提出及进一步提高转化效率的研究上。
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利用嫁接提高花生离体再生或转基因苗成活率的研究
《中国农学通报 》 2009 北大核心
摘要：【研究目的】花生(Arachis hypogaea L.)是世界上重要的油料作物。近年来,花生分子生物学发展迅速,但低效的再生和遗传转化系统严重制约着利用基因工程改良花生品种的研究,该研究旨在利用嫁接的方法提高花生再生和转化苗的成活率,缩短再生周期。【研究方法】分别采用劈接、斜接、插接的方法将再生和转化的花生苗嫁接到实生花生砧木上。【研究结果】利用嫁接技术将组培苗或转基因苗嫁接到实生苗砧木上,不同嫁接方法成活率达到70%～100%,远远高于转基因幼苗直接诱导生根移栽的成活率。【主要结论】实验证明,嫁接可提高花生再生和转化苗的成活率,可广泛应用于花生基因工程育种研究中。
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黑籽南瓜离体再生体系与转基因技术研究
《山东农业科学 》 2009
摘要：以黑籽南瓜为试验材料,子叶为外植体,建立了黑籽南瓜组织培养再生体系,并对转基因常用的抗生素浓度进行了筛选。试验结果表明:萌发4天的子叶是诱导芽再生的最佳外植体,MS+1.0 mg/L BA是诱导芽再生的最适培养基,1/2MS+0.5 mg/L GA3是适合再生苗壮苗和生根的培养基。100 mg/L卡那霉素、50 mg/L潮霉素适于南瓜的转基因,初步的转基因研究验证了此转化体系的有效性。
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农杆菌介导轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化花生的研究
《作物学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：选用鲁花14与花育23花生品种,通过农杆菌介导开展了轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化研究,从转化植株中随机选取26株表现Kan抗性植株进行nptII基因的PCR检测,结果有22株能扩增出620bp左右的nptII基因条带,阳性率约为84.62%。提取nptII基因显示为阳性的植株叶片DNA作模板,用VP4基因特异引物进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳分析,所有nptII基因阳性的植株均扩增出了约2350bp的特异性条带,而野生型没有。对部分转基因植株进一步进行PCR-Southern杂交和Southern杂交分析,发现转基因植株中出现了阳性杂交信号,表明VP4基因的确已经整合到花生的基因组中,并且是1~2个拷贝。用RT-PCR分析了11株转G1VP4基因的植株,证明插入鲁花14中的VP4基因已经正常转录,利用Westernblot方法检测筛选到的4株转基因花生,分别提取其蛋白,在30kD处出现特异性蛋白条带,这为获得转基因创新种质材料奠定了基础。
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