科研产出
苹果基因邻近未知序列的PCR扩增方法
《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：利用已知基因序列设计3个巢式PCR引物p14、p15和p16,然后设计3'端为常见酶切位点、5'端为随机引物序列p17的9个酶切位点引物。用p14外引物与9个酶切位点引物进行第1轮PCR扩增,其中前5个反应采用较低的退火温度,目的是将酶切位点引物的5'端序列引入到PCR产物中,其余反应则以此PCR产物为模板采用较高的正常退火温度进行,目的是为了使整个酶切位点引物能稳定地结合到最初反应形成的产物上。为提高PCR产物的特异性和产量,用p15和p16引物分别与p17引物配对进行第2轮和第3轮PCR扩增,电泳检查发现PCR产物条带后进行纯化和测序。为保证序列的正确性,利用测得的DNA序列再设计新引物f3x,将f3x与p14(或p15)配对、直接用提取的DNA为模板进行PCR扩增和测序。利用此方法成功地获得了苹果FPPS基因邻近的启动子序列528bp和5'UTR序列142bp,并已在GenBank注册(登录号FJ263960),利用Blastn发现这是GenBank中首次发表苹果(MalusdomesticaBorkh.)法尼基焦磷酸合酶基因(FPPS)启动子序列。
关键词： 苹果 基因 邻近序列 酶切位点引物 法尼基焦磷酸合酶 启动子
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禽类干扰素及其基因工程研究进展
《中国畜牧兽医 》 2006
摘要：干扰素是由干扰素诱生剂诱导生物细胞所产生的一类高活性多功能的糖蛋白。干扰素自被发现以来,由于其广谱抗病毒、抗肿瘤活性及其强大的免疫调节作用而受到研究者们的重视,在其基因结构、作用机理以及体外重组表达等方面都取得了巨大突破。作者综述了干扰素的基因结构、基因工程及重组干扰素的应用研究进展。
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硬脂酸脱氢酶基因ghSAD-1倒位重复构建的棉花遗传转化(英文)
《棉花学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要：以种子特异性表达的大豆凝集素基因启动子、终止子以及棉株体内硬脂酰 -ACP△ 9脱氢酶的基因 gh SAD-1进行倒位重复基因构建 ,以农杆菌介导法转化陆地棉品种 Coker3 1 5,获得了较高的转化频率。PCR、Southern杂交及种子内脂肪酸组分含量分析。结果表明 ,该倒位重复基因的表达及沉默效应在不同的转基因品系间存在差异 ,硬脂酸含量分别由对照的 2 %提高至 4%～3 8.2 % ,而棕榈酸含量则明显降低。高含硬脂酸的转基因品系可作为棉子油品质改良的基础材料 ,具有极大的潜在利用价值
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