科研产出
磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因过量表达对集胞藻PCC6803脂肪酸合成的影响
《浙江农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶（phosphopantetheinyl transferases, PPTase）是细菌脂肪酸合成中的关键酶。本研究利用同源重组手段构建集胞藻PCC6803 PPTase基因（slr0495）过量表达重组质粒，在集胞藻PCC6803中进行表达研究，并在DNA和RNA水平进行验证，同时利用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）检测不同条件下突变藻株脂肪酸组分及含量。结果表明：在温度为30℃、光照强度为50μmol·m-2·s-1的培养条件下，过量表达slr0495基因突变藻株中C12:0、C16:0和C18:0的含量分别为1.31 mg·g-1、8.07 mg·g-1和1.35 mg·g-1,比野生型藻株分别提高了23.58%、25.31%和13.45%;在温度为20℃、光照强度为50μmol·m-2·s-1、50%NaNO3的培养条件下，与野生型相比，突变藻株中C16:0和C18:0含量分别提高了44.71%和41.51%。以上结果表明，过量表达slr0495基因增加了集胞藻PCC6803中长链饱和脂肪酸的含量，并且在低温（20℃）和缺氮（50%NaNO3）双重胁迫培养条件下中长链饱和脂肪酸含量得到进一步提高。本研究为探究slr0495基因功能以及在逆境中基因产生的应激反应提供了理论依据，为微藻高产多不饱和脂肪酸代谢研究奠定了基础。
关键词： 集胞藻PCC6803 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶 脂肪酸 同源重组
全文链接
请求原文
集胞藻酰基载体蛋白基因过量表达对脂肪酸合成的影响
《浙江农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：酰基载体蛋白(ACP)是微生物脂肪酸生物合成途径中的一个关键蛋白.为了促进集胞藻脂肪酸的积累,以集胞藻PCC6803为研究对象,成功构建了用于过量表达ACP(ssl2084)基因的同源重组质粒ssl2084(+)并在集胞藻PCC6803中进行转化.将ssl2084(+)突变株进行DNA水平和蛋白质水平鉴定,结果表明,ssl2084基因已经得到过量表达.利用气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)对突变藻株在不同温度下脂肪酸的含量及组分进行检测,发现在30℃培养条件下ssl2084(+)突变株中C12:0、C16:0和C18:0的含量显著增加,分别为1.50、8.74和0.60 mg·g-1,与野生型相比分别增加了54.71%、50.82%和155.86%;在20℃低温胁迫培养条件下,C12:0、C16:0和C18:0的含量分别达到1.70、11.85和2.31 mg·g-1,与野生型相比分别增加了31.94%、47.35%和39.90%.以上结果表明,在集胞藻PCC6803中过表达ssl2084基因能提高集胞藻中的中长链脂肪酸的含量,低温条件使得集胞藻中的中长链脂肪酸的含量进一步提高.
关键词： 集胞藻PCC6803 酰基载体蛋白 同源重组 中长链脂肪酸
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
