大白菜PAT1基因的克隆及其表达载体的构建

徐凤; 宋梅芳; 王保; 高玲; 孙阳; 高建伟; 《山东农业科学 》 2009

摘要：根据GenBank中大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)基因组测序结果,分析了大白菜PAT1(phytochrome A signal transduction)基因的内含子和外显子。通过拼接外显子,获得了大白菜PAT1基因的cDNA编码序列。根据编码区序列,设计并合成了一对引物;利用这对引物,采用RT-PCR技术扩增出大白菜福山包头PAT1基因(CcPAT1)的全长cDNA序列。CcPAT1编码区共1 500 bp,与拟南芥PAT1相似性为85.03%。同时构建了含有35S启动子的pCAMBIA-2300-CcPAT1过表达载体,并利用PAT1 5′端特异区域构建了pFGC-1008-PAT1RNAi(RNA interference)载体,以备将来研究大白菜CcPAT1基因的功能。

关键词： 大白菜 PAT1基因 cDNA克隆 表达载体 RNAi