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大白菜PAT1基因的克隆及其表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 徐凤 1 ; 宋梅芳 2 ; 王保 2 ; 高玲 1 ; 孙阳 1 ; 高建伟 2 ;

作者机构: 1.青岛农业大学生命科学学院

2.山东省设施蔬菜生物学重点实验室/山东省农业科学院蔬菜研究所

关键词: 大白菜;PAT1基因;cDNA克隆;表达载体;RNAi

期刊名称: 山东农业科学

ISSN: 1001-4942

年卷期: 2009 年 02 期

页码: 1-4

摘要: 根据GenBank中大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)基因组测序结果,分析了大白菜PAT1(phytochrome A signal transduction)基因的内含子和外显子。通过拼接外显子,获得了大白菜PAT1基因的cDNA编码序列。根据编码区序列,设计并合成了一对引物;利用这对引物,采用RT-PCR技术扩增出大白菜福山包头PAT1基因(CcPAT1)的全长cDNA序列。CcPAT1编码区共1 500 bp,与拟南芥PAT1相似性为85.03%。同时构建了含有35S启动子的pCAMBIA-2300-CcPAT1过表达载体,并利用PAT1 5′端特异区域构建了pFGC-1008-PAT1RNAi(RNA interference)载体,以备将来研究大白菜CcPAT1基因的功能。

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