科研产出
鸡传染性喉气管炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
《山东农业科学 》 2024
摘要：鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)以往多感染蛋鸡,近年来在蛋种鸡、商品肉鸡中连续多发,表明该病毒感染谱有扩大风险,因此有必要加强对ILTV的监测.为建立高效、灵敏的ILTV检测方法,本研究以ILTV的TK基因为靶基因设计引物,扩增并构建pMD18-T-TK质粒标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,对其特异性、敏感性和重复性进行验证,并对临床疑似病例进行检测.结果发现,该检测方法特异性良好,与其他常见症状相似病原无交叉反应;最低检测浓度为1.55拷贝/μL,灵敏度是普通PCR方法的10倍;重复性好,批内、批间变异系数在0.79%~1.83%之间.表明本研究建立的ILTV实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,可为ILTV的临床诊断和流行病学研究等提供有效的检测方法.
关键词： 鸡喉气管炎病毒 TK基因 实时荧光定量PCR 特异性 敏感性 重复性
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传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因序列测定及TK蛋白功能初步分析
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物,以ILTV烟台株DNA为模板扩增了TK基因,并对其进行了序列测定。将ILTV烟台株的TK基因和TK蛋白分别与ILTV美国632株,英国T horne株,B e ijing E 2株,BHV-1,EHV-1,EHV-2,FHV-1,HHV-1,HHV-2,HHV-3,HHV-4,HVT,M DV-1,M DV-2,PRV和SHV-2的TK基因和TK蛋白比较后发现,其TK基因的核苷酸和TK蛋白的氨基酸同源性分别为24.6%~99.5%和15.1%~98.9%,表明不同ILTV毒株之间TK基因和TK蛋白相对保守,但与其他α-疱疹病毒的TK基因和TK蛋白同源性则较低。
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鸡传染性喉气管炎病毒TK基因的克隆与鉴定
《中国兽医科技 》 2000 北大核心 CSCD
摘要：根据鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)TK基因的核苷酸序列 ,设计并合成了 1对引物 ,利用该对引物扩增出了长180 0bp的TK基因核苷酸片段。将该基因克隆入PGEM T载体后 ,对其进行酶切分析和序列测定。结果表明 ,扩增片段与发表的ILTV的TK基因核苷酸序列一致。以ILTV、正常绒毛尿囊膜组织、鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)、鸡新城疫病毒 (NDV)感染鸡胚的尿囊膜DNA为模板进行PCR反应 ,结果该PCR反应体系对ILTV是特异的。敏感性试验表明 ,该PCR系统能检出 5 0 pg的ILTV感染尿囊膜的DNA。
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