科研产出
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6双基因真核表达载体在哺乳动物细胞中的表达
《山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集 》 2007 CSCD
摘要：为了实现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势,将构建成功的pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法转入稳定表达的细胞CHO,经G418加压筛选获得稳定表达的细胞株,以RT-PCR、SDS-PAGE、Westernblot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。结果表明：RT-PCR检测到两种目的基因的转录；SDS-PAGE检测到同时表达的两种目的蛋白；间接免疫荧光检测到目的蛋白得到表达．Westernblot证实表达的两种蛋白具有免疫活性,为PRRS亚...
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SD2株 ORF5/ORF6 CHO 蛋白的表达
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
《山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集 》 2007 CSCD
摘要：根据哺乳动物细胞真核表达载体pIRESMCSAMCSB多克隆位点的序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF50RF6基因阅读框架,并在基因起始密码子前面加入Kozak序列,分别设计了针对ORF50RF6的引物P5s/P5r,P6s/P6r。以病毒细胞培养物为模板,经RT-PCR扩增得到ORF50RF6基因,ORF50RF6PCR产物和pIRES分别经双酶切,连接构建pIRES-ORF50RF6．经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了转移载体pIRES-ORF50RF6。测得的ORF50RF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99%和100%,仍属...
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SD2株 ORF5/ORF6基因 转移栽体
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6双基因真核表达载体在哺乳动物细胞中的表达
《病毒学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：为了实现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势,将构建成功的pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法转入稳定表达的细胞CHO,经G418加压筛选获得具稳定表达的细胞株。以RT-PCR、SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。结果表明:RT-PCR检测到两种目的基因的转录;SDS-PAGE和West-ern blot检测到同时表达的两种目的蛋白;间接免疫荧光检测到目的蛋白得到表达。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SD2株 ORF5/ORF6 CHO 蛋白的表达
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PRRSV SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
《动物医学进展 》 2006
摘要：以PRRSV细胞培养物为模板,经RT-PCR扩增得到ORF5/ORF6基因,该产物和pIRES真核表达载体分别经双酶切,连接构建pIRES-ORF5/ORF6。经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了真核表达载体pIRES-ORF5/ORF6。测得的ORF5/ORF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99%和100%,属北美洲型。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征 SD2株 ORF5/ORF6基因 转移载体
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PRRSVSD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
《动物医学进展 》 2006 CSCD
摘要：以PRRSV细胞培养物为模板,经RT-PCR扩增得到ORF5/ORF6基因,该产物和pIRES真核表达载体分别经双酶切,连接构建pIRES-ORF5/ORF6。经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了真核表达载体pIRES-ORF5/ORF6。测得的ORF5/ORF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99%和100%,属北美洲型。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征 SD2株 ORF5/ORF6基因 转移载体
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