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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6双基因真核表达载体在哺乳动物细胞中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 李俊 1 ; 符芳 2 ; 袁小远 3 ; 崔尚金 2 ; 童光志 2 ; 温建新 4 ; 王金宝 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

3.山东省农业科学院家禽研究所

4.莱阳农学院

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;SD2株;ORF5/ORF6;CHO;蛋白的表达

期刊名称: 山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集

ISSN:

年卷期: 2007 年

页码: 5

收录情况: CSCD

摘要: 为了实现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势,将构建成功的pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法转入稳定表达的细胞CHO,经G418加压筛选获得稳定表达的细胞株,以RT-PCR、SDS-PAGE、Westernblot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。结果表明:RT-PCR检测到两种目的基因的转录;SDS-PAGE检测到同时表达的两种目的蛋白;间接免疫荧光检测到目的蛋白得到表达.Westernblot证实表达的两种蛋白具有免疫活性,为PRRS亚...

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