新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

于可响; 马秀丽; 韩宏宇; 刘存霞; 李玉峰; 黄兵; 宋敏训; 《生物技术通报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：建立适于基层实验室快速检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法。基于新型鸭呼肠孤病毒S3基因的6个保守区域设计了4条LAMP引物,利用Bst DNA聚合酶在63℃恒温保持45 min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了RT-LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,除NDRV外对其他6种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对病毒RNA的最低检出量为0.1 pg,是常规RT-PCR方法的100倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为98%,而且对仪器的要求低,适于基层实验室和现场检测。

关键词： 新型鸭呼肠孤病毒 S3基因 一步反转录环介导等温扩增